[发明专利]一种猪细环病毒Ⅱ型抗体间接阻断ELISA检测试剂盒有效
申请号: | 201210018567.2 | 申请日: | 2012-01-20 |
公开(公告)号: | CN102590503A | 公开(公告)日: | 2012-07-18 |
发明(设计)人: | 徐志文;朱玲;李凇;刘骁;郭万柱;廖珊 | 申请(专利权)人: | 四川农业大学 |
主分类号: | G01N33/569 | 分类号: | G01N33/569;G01N33/543;G01N33/531 |
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地址: | 625014*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | 本发明公开了一种猪细环病毒抗体间接阻断ELISA检测试剂盒。包括抗体检测板,酶结合物工作液,样品稀释液,显色液A,显色液B,终止液;阻断抗体,洗涤缓冲液;所述的阻断抗体为使用纯化后的TTV2-ORF1基因抗原表位区蛋白免疫家兔后,从家兔体内获得的多克隆抗体。本发明有益的积极效果是:特异性强、操作简单,适合于临床大规模推广应用,具有良好的市场前景。 | ||
搜索关键词: | 种猪 病毒 抗体 间接 阻断 elisa 检测 试剂盒 | ||
【主权项】:
一种猪细环病毒II型抗体间接阻断ELISA检测试剂盒,其特征在于:包括抗体检测板,酶结合物工作液,样品稀释液,显色液A,显色液B,终止液;阻断抗体,洗涤缓冲液;所述的阻断抗体为使用纯化后的TTV2‑ORF1基因抗原表位区蛋白免疫家兔后,从家兔体内获得的多克隆抗体;所述酶结合物工作液为:商品化的辣根过氧化物标记的山羊抗兔抗体,进行1∶12000稀释的稀释液,酶标二抗直接加入酶标二抗稀释液中,酶标二抗稀释液为:KH2PO40.2g,Na2HPO4·12H2O 2.9g,NaCl 29g,KCl 0.2g,PEG6000 40g,加ddH2O定容至1000ml,加入0.01%~0.05%硫柳汞,调pH至7.4;所述样品稀释液为:KH2PO4 0.2g,Na2HPO4·12H2O 2.9g,NaCl 29g,KCl 0.2g,PEG600040g,加ddH2O定容至1000ml,加入0.01%~0.05%叠氮钠,调pH至7.4;所述显色液A为:0.2mol/L Na2HPO451.4ml,0.1mol/L柠檬酸48.6ml,用HCl调pH值至5.0~5.4,加30%H2O267μl;所述显色液B为:TMB 50mg,加无水乙醇5ml,搅拌溶解后加0.1mol/L柠檬酸5ml,0.1mol/L EDTA 0.5ml,加ddH2O定容至100ml;所述终止液为2mol/L H2SO4溶液;所述抗体检测板为猪细环病毒II型ORF1基因优势抗原表位区蛋白重组抗原包被的可拆卸96孔酶标反应板,酶结合物工作液为辣根过氧化物酶标记的山羊抗兔抗体,阻断抗体为兔抗猪细环病毒II型(TTV2)ORF1基因优势抗原表位区蛋白多克隆抗体。
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