[发明专利]以适体为识别单元的胶体晶体凝胶非标记可视化检测方法

摘要

本发明公开了一种以适体为识别单元的胶体晶体凝胶非标记可视化检测方法，该方法采用胶体晶体水凝胶薄膜为载体，使适体与胶体晶体凝胶薄膜结合，通过适体与目标检测物之间高特异性、高灵敏的结合来对目标分子进行检测。在适体结合目标分子后，适体构象的改变导致胶体晶体凝胶体积的变化，凝胶体积的变化直接体现在胶体晶体反射峰即胶体晶体颜色的变化，即待测物质的有无或多少由胶体晶体凝胶薄膜的反射峰位移或颜色来体现。这种基于适体的胶体晶体水凝胶薄膜非标记可视化检测方法具有灵敏度高，特异性好，操作简单、检测成本低廉等优点。

主权项

一种以适体为识别单元的胶体晶体凝胶非标记可视化检测方法，其特征在于所述方法包括以下步骤：（1）胶体晶体水凝胶薄膜的制备：将单分散的胶体纳米粒子加入水凝胶前聚体溶液中，调节胶体纳米粒子溶液中胶体纳米粒子的质量百分数为10%～80%，超声分散，直至胶体纳米粒子溶液产生结构色；然后加入引发剂后，灌入模具，静置0.1～2 h，经紫外光照射聚合或烘箱内通过热固化法对结构色胶体溶液进行固化，即得胶体晶体水凝胶薄膜，将所得到的胶体晶体水凝胶薄膜从模具上剥落，洗涤后置于纯水中保存；（2）适体修饰的胶体晶体水凝胶薄膜的制备：通过化学键偶联方法将适体偶联在步骤（1）中洗涤后的胶体晶体水凝胶薄膜上，制成适体修饰的胶体晶体水凝胶薄膜，将制备好的薄膜用磷酸缓冲液洗涤之后得到检测用的胶体晶体水凝胶薄膜，测定检测用的胶体晶体水凝胶薄膜的反射光谱；（3）目标分析物的检测：将步骤（2）中得到的检测用的胶体晶体水凝胶薄膜在缓冲溶液中与待测样品混合进行适体和样品的特异性结合反应，反应完毕，洗涤后检测反应后的胶体晶体水凝胶薄膜的反射光谱，通过比较反应前后胶体晶体水凝胶薄膜的颜色或通过测定胶体晶体水凝胶薄膜的反射光谱，确定待测物质的含量。