[发明专利]一种补体系统激活水平的ELISA检测方法

摘要

本发明属于免疫学检测方法领域。公开了一种补体系统激活水平的ELISA检测方法，本发明针对补体系统的经典、替代和甘露糖三条激活途径，分别用三种不同的激活物包被96孔高吸附性酶标板，实现在体外激活补体系统，并利用多克隆抗补体抗体为中间物，捕获激活补体，以抗IgG-HRP为酶标检测抗体，以此反映补体系统的激活情况。本发明中采用二步法作为放大系统替代传统的三步法。本方法耗时少，操作过程简便，能节省地高辛标记抗体的步骤，使实验更加便捷。本方法弥补了现有溶血实验不能测定补体甘露糖途径激活情况的缺陷，尤其适用于检测药物对补体系统的抑制作用，建立了全新的快速高效的补体抑制剂离体筛选方法。

主权项

一种补体系统激活水平的ELISA检测方法，其特征在于，其针对经典途径、替代途径和甘露糖途径三条激活途径，分别用免疫球蛋白IgM、脂多糖LPS和甘露糖三种激活物包被96孔高吸附性酶标板；封板后加入含补体的豚鼠血清与待研的药物，与酶标板上固化的激活物作用，使豚鼠血清中的补体系统被激活；以抗补体抗体为一抗，捕捉被激活裂解的补体片段；以抗IgG‑HRP为酶标检测抗体，建立检测补体激活水平的ELISA方法。