[发明专利]一种烟草HPLC指纹图谱数据库的建立方法及应用

摘要

本发明提供一种烟草HPLC指纹图谱数据库的建立方法，经过烤烟成分提取、HPLC指纹图谱分析，得到烤烟原始指纹图谱数据库，通过计算机编程技术，将烤烟原始指纹图谱数据库转换成烤烟指纹图谱分时数据库，采用主成份分析法对烤烟指纹图谱分时数据库进行分析，以达到对不同品质的烟叶进行分类的目的。本发明能客观的描述烤烟指纹图谱的信息特征，更科学地反映烟草的内在品质，能取代传统的人工评吸及普通化学测定等方法在烤烟品质判定实际中应用，对于提高烟草品质评价的科学性及提高烤烟生产经济效益具有重要意义。本发明的特征是，利用指纹图谱分时软件建立烤烟指纹图谱的分时数据库，通过主成份－聚类分析方法建立烤烟质量分类体系。本发明还公开了这一方法在烤烟品质分级、打叶配方及品牌识别中的应用。

主权项

一种烟草HPLC指纹图谱数据库的建立方法，其特征步骤在于：1)、烤烟成分提取：以甲醇为提取剂，提取条件为：液固比v/g为20－40，提取温度为20～30℃，超声波提取时间50～60min，离心分离后取上清液过0.45µm的滤膜，滤液为待测溶液；2)、HPLC指纹图谱分析：取步骤1)的待测溶液，采用HPLC进行指纹图谱分析，得到烤烟原始指纹图谱数据库，分析条件为：C18色谱柱，流动相A为乙腈，流动相B为0.08～0.2% 的甲酸；梯度洗脱程序：不同分析时间时，流动相A与B体积比分别是：0min时为0～5:95～100，30min时为 20～25:75～80，45min时为30～40:60～70，55min时为50～60:40～50并保持5 min，停止色谱分析；65min时，A与B的体积比为0～5:95～100；保持2min后运行5min；其体积流量范围：0.8－1.2 ml/min；柱温：20～30℃，检测波长：250nm；3)、指纹图谱分时数据库的建立：通过计算机编程技术，将步骤2）得到的烤烟原始指纹图谱数据库转换成烤烟指纹图谱分时数据库；4)、主成份－聚类分析法判定烟草品质级别：采用主成份分析法对步骤3）的烤烟指纹图谱分时数据库进行分析，提取主成份，对不同样品的主成份值进行聚类分析；或者直接对步骤3）的烤烟指纹图谱分时数据库指标进行聚类分析，以达到对不同品质的烟叶进行分类的目的。