[发明专利]一种烟草HPLC指纹图谱数据库的建立方法及应用

权利要求书

1.一种烟草HPLC指纹图谱数据库的建立方法，其特征步骤在于：

1)、烤烟成分提取：以甲醇为提取剂，提取条件为：液固比v/g为20－40，提取温度为20～30℃，超声波提取时间50～60min，离心分离后取上清液过0.45μm的滤膜，滤液为待测溶液；

2)、HPLC指纹图谱分析：取步骤1)的待测溶液，采用HPLC进行指纹图谱分析，得到烤烟原始指纹图谱数据库，分析条件为：C18色谱柱，流动相A为乙腈，流动相B为0.08～0.2% 的甲酸；梯度洗脱程序：不同分析时间时，流动相A与B体积比分别是：0min时为0～5:95～100，30min时为 20～25:75～80，45min时为30～40:60～70，55min时为50～60:40～50并保持5 min，停止色谱分析；65min时，A与B的体积比为0～5:95～100；保持2min后运行5min；其体积流量范围：0.8－1.2 ml/min；柱温：20～30℃，检测波长：250nm；

3)、指纹图谱分时数据库的建立：通过计算机编程技术，将步骤2）得到的烤烟原始指纹图谱数据库转换成烤烟指纹图谱分时数据库；

4)、主成份－聚类分析法判定烟草品质级别：采用主成份分析法对步骤3）的烤烟指纹图谱分时数据库进行分析，提取主成份，对不同样品的主成份值进行聚类分析；或者直接对步骤3）的烤烟指纹图谱分时数据库指标进行聚类分析，以达到对不同品质的烟叶进行分类的目的。

2.根据权利要求1所述的烟草HPLC指纹图谱分时数据库的建立方法，其特征在于所述步骤1）的超声波频率为20～80MHz，离心机离心力为5,000～12,000 g，离心时间8～15min。

3.根据权利要求1所述的烟草HPLC指纹图谱分时数据库的建立方法，其特征在于所述步骤3）的分时数据库的时长为1-5min。

4.一种如权利要求1所述的方法在烤烟品质分类及品牌烟叶识别中的应用。