[发明专利]一种糯玉米杂交种遗传纯度的快速鉴定方法

摘要

本发明属于生物技术领域，涉及一种糯玉米杂交种遗传纯度的快速鉴定方法。其步骤是：提取糯玉米基因组DNA，利用筛选出的SRAP有效引物组合NAUSRem7/NAUSRpm1以及RAPD有效引物NAURP709、NAURP712进行PCR扩增，将扩增后的PCR产物分别进行非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和琼脂糖凝胶电泳，拍摄DNA电泳图谱。通过比较和分析电泳图谱中的DNA片段序列差异形成的多态性扩增片段大小与位置差异，进行糯玉米F1杂交种‘苏玉糯2号’种子遗传纯度的鉴定。本发明的检测方法具有标记稳定，准确性高，不受被测样品生长阶段与环境影响，成本低，且在整个生长季节都可以进行等优点。

主权项

糯玉米品种‘苏玉糯2号’种子遗传纯度的鉴定方法，其特征在于包括以下步骤：1)提取‘苏玉糯2号’幼苗基因组DNA；2)利用SRAP引物组合NAUSRem7/NAUSRpm1，或RAPD引物NAURP709与NAURP712，以糯玉米‘苏玉糯2号’基因组DNA为模板进行PCR扩增，亦或者同时利用SRAP引物组合NAUSRem7/NAUSRpm1，和RAPD引物NAURP709与NAURP712，以糯玉米‘苏玉糯2号’基因组DNA为模板进行PCR扩增；所述的SRAP引物组合序列为：正向引物NAUSRem7：SEQ ID No.1；反向引物NAUSRpm1：SEQ ID No.2；RAPD引物序列：NAURP709：SEQ ID No.3；NAURP712：SEQ ID No.4；3)将扩增后的DNA片段，分别利用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测SRAP扩增产物，利用琼脂糖凝胶电泳检测RAPD扩增产物；4)对电泳结果进行分析，将同时具有母本、父本特异性标记条带的单株判定为真正的杂交种，计算种子遗传纯度，其中：SRAP引物组合NAUSRem7/NAUSRpm1产生大小为170bp母本特异性标记条带，和150bp父本特异性标记条带；RAPD引物NAURP709产生大小为790bp母本特异性标记条带；NAURP712产生大小为1250bp父本特异性标记条带。