[发明专利]一种定量检测硫代氧化型辅酶（Thio-NAD）的循环酶检测方法和试剂盒有效
| 申请号： | 201110298422.8 | 申请日： | 2011-09-30 |
| 公开（公告）号： | CN102507463A | 公开（公告）日： | 2012-06-20 |
| 发明（设计）人： | 商纯尔;陈青松 | 申请（专利权）人： | 浙江夸克生物科技有限公司 |
| 主分类号： | G01N21/31 | 分类号： | G01N21/31 |
| 代理公司： | 杭州宇信知识产权代理事务所(普通合伙) 33231 | 代理人： | 张宇娟 |
| 地址： | 312500 浙江*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种定量检测硫代氧化型辅酶(Thio-NAD)的循环酶检测方法，包括：配制pH8.5-10.50Tris-HCl缓冲液，其中含有一定量的辅酶I(NADH)、脱氧胆酸钠溶液、3α-羟类固醇脱氢酶(3α-HSD)、海藻糖，加入含有Thio-NAD的待测样品。3α-HSD将胆酸钠或脱氧胆酸钠脱氢氧化形成3α-酮类固醇，同时将Thio-NAD还原成还原型硫代辅酶(Thio-NADH)；在溶液中NADH的存在下，3α-HSD可将3α-酮类固醇重新还原成胆酸钠或其衍生物，同时将NADH脱氢氧化成NAD+。反应中生成的Thio-NADH在405nm处有最大吸收，通过测定37℃反应一段时间后特定波长下溶液的吸光度值，计算出待物中Thio-NAD的含量。该法绿色环保、测定试剂稳定，特别适合Thio-NAD的批量检测。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 定量 检测 氧化 辅酶 thio nad 循环 方法 试剂盒 | ||
【主权项】：
一种定量检测硫代氧化型辅酶(Thio‑NAD)的循环酶检测方法，其特征在于：配制pH8.5‑10.50Tris‑HCl缓冲液，其中含有一定量的辅酶I(NADH)、脱氧胆酸钠、3α‑羟类固醇脱氢酶(3α‑HSD)、海藻糖，加入含Thio‑NAD的待测样品，反应中生成的Thio‑NADH在405nm处有最大吸收，通过测定37℃反应一段时间后特定波长下溶液的吸光度值，计算出待测样品中Thio‑NAD的含量。
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