[发明专利]特异性抗耐药白色念珠菌鸡卵黄抗体IgY及其制备方法与用途

摘要

特异性抗耐药白色念珠菌鸡卵黄抗体IgY及其制备方法与用途，涉及一种生物制药技术。本发明制备高免疫原性耐药性白色念珠菌抗原，免疫产蛋母鸡，采用水稀释法提取IgY；该方法制备的IgY抗体效价＞1∶2560。IgY对热及酸碱（pH3～11）稳定性好，可抵抗胃酸屏障，并能抗胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶的消化；对阴道黏膜无刺激，对人类无致病作用，无急性和慢性毒性作用，无致畸、致癌作用，外用或口服无不良反应。用于临床耐药白色念珠菌感染，特别适用于复发性白色念珠菌阴道炎。

主权项

特异性抗耐药白色念珠菌鸡卵黄抗体IgY，其特征在于采用包括如下步骤的制备方法制得： （1）制备高免疫原性耐药性白色念珠菌抗原：筛选临床耐药性白色念珠菌，经药敏试验及PCR鉴定，纯培养后调整细胞浓度为（1～5）×106‑8CFU/ml，并将其与等浓度白色念珠菌标准株按体积比（0.5～2）∶1混合，制备出高免疫原性抗原混悬液；（2）免疫产蛋母鸡，追踪IgY抗体效价：选用高产蛋的良种鸡，以氟氏不完全佐剂与步骤（1）所述抗原混悬液按体积比1∶1混匀后，于蛋鸡皮下多点接种进行初次免疫，共1.0ml/只，3周左右，再用步骤（1）所述抗原混悬液于蛋鸡腋静脉加强免疫1次，每次0.5ml/只，收集初次免疫1周后的鸡蛋，采用聚乙二醇法跟踪提取IgY，用ELISA法测定卵黄抗体效价，当IgY抗体效价＞1∶2000，为有效蛋；（3）采用水稀释法制备特异性抗耐药白色念珠菌IgY：无菌取蛋黄去脂、打碎，加体积倍数为5～9倍蒸馏水稀释，用盐酸和氢氧化钠调pH至5.2，置4℃静置6h，离心取上清，超滤浓缩，56℃下灭活病毒30min，即为液态IgY初提物，或再冷冻干燥得干粉，得到固态IgY初提物。