[发明专利]磁珠法提取细菌质粒DNA的试剂盒及其提取方法有效
申请号: | 201110204053.1 | 申请日: | 2011-07-21 |
公开(公告)号: | CN102242115A | 公开(公告)日: | 2011-11-16 |
发明(设计)人: | 王平康;杜德光;宋昕;孙荣青;李祺;曹露聪 | 申请(专利权)人: | 河南惠尔纳米科技有限公司 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 洛阳市凯旋专利事务所 41112 | 代理人: | 陆君 |
地址: | 450001 河南省郑*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | 本发明公开一种磁珠法提取细菌质粒DNA的试剂盒及其提取方法,该试剂盒包括菌体重悬液、裂解液、中和液、磁珠结合液、洗涤液和洗脱液六种组分,试剂盒提取方法包括以下步骤:菌体重悬、裂解、中和、磁珠结合、洗涤、洗脱。本发明提取的质粒DNA纯度高,片段完整,提取过程方便快捷,高效安全。 | ||
搜索关键词: | 磁珠法 提取 细菌 质粒 dna 试剂盒 及其 方法 | ||
【主权项】:
一种磁珠法提取细菌质粒DNA的试剂盒,其特征是:其包括菌体重悬液、裂解液、中和液、磁珠结合液、洗涤液和洗脱液六种组分,各组分的内容如下:菌体重悬液:40~60mmol/L葡萄糖,PH7.6~8.4、20~30mmol/L Tris,PH7.6~8.4、5~15mmol/L EDTA,95~115℃灭菌10~30min,2~4℃保存;裂解液:0.15~0.3mol/L NaOH,质量浓度0.8~1.6% 的SDS;中和液:4~5mol/L乙酸钾,4.5~5.5mol/L冰乙酸;磁珠结合液:95~105ml异丙醇,3.5~4.5ml磁珠混悬液,二者混合配制成混悬液,其中磁珠混悬液由磁珠和水按照1:2体积比混合配置而成;洗涤液:由20~30mmol/L Tris,8~13mmol/L EDTA,140~160mmol/L Na盐和无水乙醇混合组成,其中Tris、EDTA、Na盐与无水乙醇的价体积比为30%:70%;洗脱液:6~10mmol/L Tris,PH8.0~8.5。
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