[发明专利]一种重组人胰岛素原转肽方法及其在重组人胰岛素下游纯化中的应用有效
申请号: | 201110186944.9 | 申请日: | 2011-07-05 |
公开(公告)号: | CN102864198A | 公开(公告)日: | 2013-01-09 |
发明(设计)人: | 郭颀然;许必雄 | 申请(专利权)人: | 上海泰龙生物医药科技有限公司 |
主分类号: | C12P21/06 | 分类号: | C12P21/06;C07K14/62;C07K1/16;C12R1/84 |
代理公司: | 上海光华专利事务所 31219 | 代理人: | 许亦琳;余明伟 |
地址: | 201203 上海市浦东新*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明提供了一种重组人胰岛素原转肽方法及其在重组人胰岛素下游纯化中的应用,本发明的重组人胰岛素原转肽方法为将纯化的重组人胰岛素原经转肽反应生成重组人胰岛素,其中,转肽反应的反应体系包括:重组人胰岛素原10-30g/L、二甲基亚砜(DMSO)100-200ml/L、叔丁醚苏氨酸叔丁酯63-103g/L、1,4-丁二醇600-800ml/L、胰蛋白酶2-6g/L、Ca2+0.2-100mmol/l、Mg2+0.2-100mmol/l和水,pH为6.5-7.0;转肽反应的反应条件为:温度27-47℃,搅拌反应2-10小时。本发明的重组人胰岛素原转肽方法可用于重组人胰岛素的下游纯化。本发明的转肽方法不仅缩短了转肽反应的时间、提高了生产效率,还能减少副产物的产生。 | ||
搜索关键词: | 一种 重组 胰岛素 原转肽 方法 及其 下游 纯化 中的 应用 | ||
【主权项】:
一种重组人胰岛素原转肽方法,为将纯化的重组人胰岛素原经转肽反应生成重组人胰岛素,其特征在于,所述转肽反应的反应体系包括:重组人胰岛素原10‑30g/L、二甲基亚砜(DMSO)100‑200ml/L、叔丁醚苏氨酸叔丁酯63‑103g/L、1,4‑丁二醇600‑800ml/L、胰蛋白酶2‑6g/L、Ca2+0.2‑100mmol/l、Mg2+0.2‑100mmol/l和水,pH为6.5‑7.0;所述转肽反应的反应条件为:温度27‑47℃,搅拌反应2‑10小时。
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