[发明专利]基于线粒体细胞色素b序列的日本鲭和澳洲鲭的鉴别方法

摘要

本发明涉及一种基于线粒体细胞色素b序列的日本鲭和澳洲鲭的鉴别方法，包括：提取日本鲭与澳洲鲭肌肉组织中总基因组DNA；PCR扩增反应；PCR产物测序及校对；Cytb碱基矩阵的构建。本发明方法简单、快速、准确、高效的鉴别这两种鲭属鱼类。

主权项

一种基于线粒体细胞色素b序列的日本鲭和澳洲鲭的鉴别方法，包括：(1)提取日本鲭与澳洲鲭肌肉组织中总基因组DNA；(2)PCR扩增反应通用引物L14724和H15915的具体序列为：L14724，5’‑GAC TTG AAA AAC CAC CGTTG‑3’；和H15915，5’‑CTC CGA TCT CCG GAT TAC AAG AC‑3’；(3)PCR产物测序及校对将上述PCR产物用含溴化乙锭的0.8％琼脂糖凝胶电泳回收纯化后，在测序仪上进行双向测序，其测序引物仍为PCR扩增引物，测序结果经校对拼接后，用软件进行比对，获得一致序列；(4)Cytb碱基矩阵的构建统计两种鲭鱼的变异位点，找出各自的固定位点，构建碱基矩阵。