[发明专利]一种治疗乳腺增生病的浓缩丸剂的检测方法

摘要

本发明公开了一种治疗乳腺增生病的浓缩丸剂的检测方法，包括性状、鉴别、丸剂常规检查、浸出物检查、含量测定5个步骤，所述浓缩丸剂配方为柴胡125g、香附125g、大黄（酒炙）83.4g、青皮83.4g、川芎83.4g、莪术83.4g、土鳖虫83.4g、浙贝母83.4g、当归125g、白芍125g、王不留行83.4g。该检测方法有利于保证成品的质量。

主权项

一种治疗乳腺增生病的浓缩丸剂的检测方法，包括性状、浸出物检查、鉴别、丸剂常规检查、含量测定五个步骤，a、性状为：本品为黑色炭衣浓缩丸，丸芯为黑褐色；气芳香，味微咸苦；b、浸出物检查为：取重量差异项下的本品约4g，研细，精密称定，置锥形瓶中，加甲醇l00ml，密塞，称定重量，置水浴上回流1小时，放置至室温，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液50ml，蒸干，残渣加l0％氢氧化钠溶液5ml使溶解，并转移至分液漏斗中，加水25ml洗涤蒸发皿，洗液并入同一分液漏斗中，摇匀，用水饱和的正丁醇提取4次，每次30ml，合并正丁醇提取液，加水洗涤2次，每次40ml，弃去水液，正丁醇液置已干燥至恒重的蒸发皿中，在水浴上蒸干后，于105℃干燥3小时，置干燥器中冷却30分钟，迅速精密称定重量，计算，即得；本品含正丁醇浸出物不得少于1.2％； c、鉴别为：（1）柴胡的薄层色谱鉴别：取浸出物检查项下的正丁醇浸出物，加甲醇5ml使溶解，作为供试品溶液；另取柴胡对照药材0.5g，加甲醇20ml超声处理20分钟，滤过，滤液浓缩至约5ml，作为对照药材溶液；再取柴胡皂苷a对照品，加甲醇制成每lml含0.5 mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法；试验，吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯‑乙醇‑水8:2:1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2％对二甲氨基苯甲醛的40％硫酸溶液，在60℃加热至斑点显色清晰，置日光及紫外光灯365 nm下检视供试品色谱中，在与对照药材及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点或荧光斑点；（2）香附的薄层色谱鉴别：取本品10g，研细，置园底烧瓶中，加水250ml，连接挥发油测定器与回流冷凝管，再加入2ml乙酸乙酯，回流10分钟，放置至室温，取乙酸乙酯层作为供试品溶液另取α‑香附酮，加乙酸乙酯制成每1m1含lmg的溶液作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以甲苯‑乙酸乙酯‑冰醋酸92:5:5为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯254 nm下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；喷以二硝基苯肼试液，放置片刻，斑点渐变为橙红色；（3）大黄的薄层色谱鉴别：取本品0.3g，研细，加甲醇20m1，超声处理15分钟，滤过，取滤液5m1，蒸干，残渣加水10ml使溶解，再加盐酸1ml，加热回流30分钟，立即冷却，用乙醚分2次振摇提取，每次20m1，合并乙醚液，蒸干，残渣加三氯甲烷1m1使溶解，作为供试品溶液；另取大黄对照药材0.1g，同法制成对照药材溶液；再取大黄酸对照品，加甲醇制成每1m1含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚（30～60℃）‑甲酸乙酯‑甲酸15:5:1的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365 nm下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的五个橙黄色荧光主斑点；在与对照品色谱相应的位置上，显相同的橙黄色荧光斑点，置氨蒸气中熏后，斑点变为红色；（4）青皮的薄层色谱鉴别：取本品2g，研细，加甲醇20ml，加热回流20分钟，滤过，取滤液10ml，蒸干，残渣加水2ml使溶解，通过D10l大孔吸附树脂柱内径1.5cm，长9cm，柱上端加1g中性氧化铝，先以水100m1洗脱，弃去，再以2％吡啶甲醇50m1洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取橙皮苷对照品，加甲醇制成饱和溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法；试验，吸取上述两种溶液各2μl，分别点于同一用硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯‑甲醇‑水100:27:13为展开剂，展至约3cm，取出，晾干，再以甲苯‑乙酸乙酯‑甲酸‑水20:10:1:1的上层溶液为展开剂，展至约8cm，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，置紫外光灯365nm下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；（5）浙贝母的薄层色谱鉴别：取本品10g，研细，加浓氨试液2ml与三氯甲烷50m1，放置过夜，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇lml使溶解，拌入少许中性氧化铝，水浴上拌匀干燥，加于中性氧化铝柱（100‑200目，2g，内径约15mm）上，用乙醇50ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加乙醇lml使溶解，作为供试品溶液；另取贝母素甲对照品，加乙醇制成每lml含2mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法；试验，吸取对照品溶液2μl、供试品溶液10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯‑甲醇‑浓氨试液17:2:1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；（6）白芍的薄层色谱鉴别：取本品2g，研细，加甲醇20ml，加热回流20分钟，滤过，取滤液l0ml，蒸干，残渣加水2ml使溶解，通过D101大孔吸附树脂柱内径1.5cm，长9cm，柱上端加lg中性氧化铝，先以水l00ml洗脱，弃去，再以2％吡啶甲醇50ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液；另取芍药苷对照品，加乙醇制成每lml含lmg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷‑乙酸乙酯‑甲醇‑甲酸40:5:10:0.2为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；d、丸剂常规检查为：应符合中国药典丸剂项下有关的各项规定；e、含量测定 ：色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇‑水‑冰醋酸75:25:1为流动相；检测波长254nm；理论板数按大黄素峰计算应不低于3000； 对照品溶液的制备：精密称取芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚对照品适量，加甲醇分别制成每lml含大黄酸、大黄素、大黄酚各150μg，芦荟大黄素、大黄素甲醚各75μg的溶液；分别精密量取上述对照品溶液各2ml，混匀，即得每lml含大黄酸、大黄素、大黄酚各30μg，芦荟大黄素、大黄素甲醚各15μg；供试品溶液的制备：取重量差异项下的本品，研细，取约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，加热回流30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液10ml，置50ml烧瓶中，挥去甲醇，加水10ml，盐酸lml，加热回流30分钟，立即冷却，并转移至分液漏斗中，用少量三氯甲烷洗涤容器，并入分液漏斗中，以三氯甲烷提取5次，每次30ml，合并三氯甲烷液，以水50ml洗涤一次，弃去水液，三氯甲烷液蒸干，残渣加甲醇定量转移至10ml量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，滤过，即得；测定法：分别精密吸取上述对照品溶液与供试品溶液各5μ1，注入液相色谱仪，测定，即得；本品每丸含酒大黄以芦荟大黄素C15H10O5、大黄酸C15H806、大黄素C15H1005、大黄酚C15H10O4和大黄素甲醚C16H12O5的总量计，不得少于0.6mg。