[发明专利]一种从荚膜细菌发酵液纯化荚膜多糖的方法

摘要

本发明公开了纯化荚膜多糖的方法，包括：将荚膜细菌发酵液离心，收集上清液，超滤浓缩，乙醇沉淀，收集上清液；乙醇沉淀，收集沉淀，注射水复溶；加入蛋白酶酶解，超滤蛋白酶解液；加入十六烷基三甲基溴化铵和NaCl，该NaCl的质量百分比终浓度为0.2％-0.3％，离心，收集上清液；加入十六烷基三甲基溴化铵和NaCl，该NaCl的质量百分比终浓度为0.1％-0.15％，离心，收集沉淀，溶解沉淀；加入乙醇沉淀，收集沉淀，注射水复溶；超滤，膜过滤。本发明的纯化方法荚膜多糖回收率高，蛋白质及核酸含量低，去除了传统提纯中利用有毒有机试剂的步骤，简化了纯化步骤，节省了时间和成本。

主权项

一种从荚膜细菌发酵液纯化荚膜多糖的方法，其特征在于该方法包括下列步骤：a.将荚膜细菌发酵液离心，收集上清液，超滤浓缩上清液，加入乙醇沉淀，使该乙醇的体积百分比终浓度为20％‑45％，收集上清液；b.加入乙醇沉淀，使该乙醇的体积百分比终浓度为70％‑95％，收集沉淀，用注射水复溶，得复溶液；c.加入蛋白酶，得蛋白酶解液，超滤蛋白酶解液，得超滤液；d.加入十六烷基三甲基溴化铵和NaCl，该NaCl的质量百分比终浓度为0.2％‑0.3％，离心，收集上清液；e.加入十六烷基三甲基溴化铵和NaCl，该NaCl的质量百分比终浓度为0.1％‑0.15％，离心，收集沉淀，溶解沉淀；f.加入乙醇沉淀，该乙醇的体积百分比终浓度为70％‑95％，收集沉淀，用注射水复溶，得复溶液；g.将步骤f中所得的复溶液进行超滤，膜过滤，得到纯化的荚膜多糖。