[发明专利]抗艾滋病药物筛选方法无效
申请号: | 201110021787.6 | 申请日: | 2011-01-15 |
公开(公告)号: | CN102174658A | 公开(公告)日: | 2011-09-07 |
发明(设计)人: | 王英杰;吴南屏;冯婷婷 | 申请(专利权)人: | 浙江大学 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/18;C12R1/93 |
代理公司: | 杭州中成专利事务所有限公司 33212 | 代理人: | 金祺 |
地址: | 310027 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明公开了一种抗艾滋病药物筛选方法,包括以下步骤:1)将待测药物稀释成不同浓度的药物溶液;2)将JLTRG细胞放入上述药物溶液中进行抚育;3)加入含有5%FBS、1%链霉素和1%青霉素的1640培养基以及H9细胞进行共培养;4)用细胞流式仪测定绿色荧光的表达情况,根据绿色荧光细胞百分率和平均荧光强度得出纠正之后的细胞荧光值;5)分别设置阳性对照和阴性对照;6)根据上述实验结果测得待测药物对抗艾滋病半数有效剂量。采用本发明的方法能快速有效的完成抗艾滋病药物的筛选。 | ||
搜索关键词: | 艾滋病 药物 筛选 方法 | ||
【主权项】:
抗艾滋病药物筛选方法,其特征是包括以下步骤: 1)、将待测药物稀释成不同浓度的药物溶液;2)、将上述不同浓度的药物溶液1毫升各自放入一个培养皿小孔内,然后在每个小孔内各放入数量为106的JLTRG细胞,于36.8~37.2℃的细胞培养箱中进行抚育,细胞培养箱中CO2的浓度为5%,湿度为75%,抚育时间为5~7小时;3)、在1毫升的含有5% FBS、1%链霉素和1%青霉素的1640培养基中加入数量为105的H9细胞,得悬浮液;在步骤2)所得的每孔内加入上述悬浮液,于36.8~37.2℃的细胞培养箱中进行共培养,细胞培养箱中CO2的浓度为5%,湿度为75%;共培养的时间为68~76小时;4)、在荧光显微镜下观察步骤3)所得的细胞绿色荧光强度和密度;用细胞流式仪测定绿色荧光的表达情况,通过绿色荧光细胞百分率和平均荧光强度的乘积,再除以90%的计算方法,得出纠正之后的细胞荧光值;5)、分别设置阳性对照和阴性对照:以没有加入药物单纯加入H9细胞的组为阳性对照,以没有加入药物也没有加入H9细胞的组为阴性对照;6)、根据上述实验结果测得待测药物对抗艾滋病半数有效剂量。
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