[发明专利]RNA指数式扩增的方法以及RNA反应器无效
| 申请号： | 201080046916.0 | 申请日： | 2010-10-21 |
| 公开（公告）号： | CN102597264A | 公开（公告）日： | 2012-07-18 |
| 发明（设计）人： | 雅克·罗哈耶姆 | 申请（专利权）人： | 里博克斯艾克斯有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 上海智信专利代理有限公司 31002 | 代理人： | 邓琪 |
| 地址： | 德国拉德博*** | 国省代码： | 德国;DE |
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| 摘要： | 本发明涉及一种采用引物非依赖性RNA依赖性的RNA聚合酶(RdRp)进行RNA指数式扩增的方法，其中反应物进行预混循环，然后转移至反应室中，在该反应室进行互补链的聚合反应以及产物双链RNA的分离。本发明还涉及一种用于实现RNA指数式扩增的RNA反应器。 | ||
| 搜索关键词： | rna 指数 扩增 方法 以及 反应器 | ||
【主权项】：
一种RNA指数式扩增的方法，包括以下步骤：(a)在混合室中将单链RNA，引物非依赖性RNA依赖性的RNA聚合酶(RdRp)，NTPs，反应缓冲液，以及，可选地，RNA合成引发寡核苷酸混合；(b)将步骤(a)中的混合物转移至反应室；(c)可选地，将所述RNA合成引发寡核苷酸退火到所述单链RNA上；(d)在所述反应室中将所述混合物在条件下温育，使得引物非依赖性RdRp从头合成出与所述单链RNA互补的RNA链，可选地，所述RdRp延伸杂交到所述单链RNA上的RNA合成引发寡核苷酸从而形成双链RNA；(e)将步骤(d)中形成的所述双链RNA分离成单链RNA；(f)在混合室中将引物非依赖性RdRp，NTPs，反应缓冲液，以及，可选地，RNA合成引发寡核苷酸混合；(g)将步骤(e)中的混合物转移至所述反应室中；(h)重复步骤(d)‑(g)，或者，可选地，(c)‑(g)至少5次；(i)进行最终的温育步骤(d)从而合成终产物双链RNA，以及，可选地，(j)从所述反应室回收所述终产物双链RNA。
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