[发明专利]一种烷基酚类药物通用人工抗原的合成方法

摘要

一种烷基酚类药物的通用人工抗原的合成方法，属于生物化工技术领域。本发明以壬基酚NP为半抗原，用活性酯法将其与载体蛋白牛血清白蛋白BSA偶联，制得壬基酚-牛血清白蛋白偶联物，即为烷基酚类药物通用人工抗原；用聚丙烯酰胺凝胶电泳测定偶联物的偶联比。本发明成功合成了烷基酚类药物的通用人工抗原，合成步骤简洁，有效，完全可用于免疫分析当中，为以后人们的研究提供了必需的人工抗原，可以满足国内对其研究的需要。

主权项

一种烷基酚类药物通用人工抗原的合成方法，其特征在于以壬基酚为半抗原，用活性酯法将其与载体蛋白牛血清白蛋白BSA偶联，用聚丙烯酰胺凝胶电泳测定偶联物的偶联比；步骤为：（1）人工抗原的合成：壬基酚、N‑羟基硫代琥珀酰亚胺、碳二亚胺、牛血清白蛋白控制摩尔比为80︰120︰136︰1的比例反应，壬基酚溶液溶于含二甲基吡啶的戊二酸酐的无水乙醇和吡啶混合溶液中，65℃搅拌反应24h后用真空旋转蒸发提纯，再加N,N‑二甲基甲酰胺DMF溶剂溶解后，加入N‑羟基硫代琥珀酰亚胺和碳二亚胺搅拌反应6h，为A液；牛血清白蛋白溶于磷酸盐缓冲液中，为B液；将A液逐滴加入B液中，室温下搅拌反应3h，离心取上清液得壬基酚‑BSA混合液，即为烷基酚类药物通用人工抗原混合液；透析袋前处理：取10cm的透析袋，于沸水中煮沸5min，再用60℃的去离子水冲洗3min，保存在4℃去离子水中备用；将人工抗原混合液移入透析袋中，用每次2L的0.01M的PBS溶液透析2次，再用每次2L的去离子水透析2次，共透析3天；最后使用冻干法将透析袋中的液体制成粉末，得壬基酚‑BSA偶联物，即是烷基酚类药物通用人工抗原；（2）人工抗原的鉴定：壬基酚‑BSA偶联物采用聚丙烯酰胺凝胶电泳测定其偶联比。