[发明专利]一种用于城市剩余污泥中沙门氏菌的定量检测方法

摘要

一种用于城市剩余污泥中沙门氏菌的定量检测方法，属于生物技术中城市剩余污泥的病原菌检测技术领域。检测步骤如下：①污泥样品的梯度稀释以及前增菌培养；②选择性增菌培养；③显色培养基分离鉴别；④用MPN计数软件计算得出结果。本发明结合了MPN方法和食品安全国家标准中沙门氏菌检测方法，既实现了城市剩余污泥中沙门氏菌检测的需要，又由于选择性效果明显，避免了污泥中大量杂菌的干扰，有利于沙门氏菌的快速定量。本发明为制定和改进城市剩余污泥处理处置以及应用标准等方面具有重要的理论价值和实际指导意义。

主权项

一种用于城市剩余污泥中沙门氏菌的定量检测方法，其特征在于步骤为：（1）污泥样品的梯度稀释以及前增菌培养：称取5g城市剩余污泥，加入盛有45mL缓冲蛋白胨水BPW的250mL锥形瓶中，涡旋震荡5‑10min，混合均匀得泥水混合物；用缓冲蛋白胨水稀释混匀的泥水混合物，得到各个稀释梯度，设5‑7个稀释度；采用三管或者五管平行法，每个稀释度设3‑5个重复样，于36℃±1℃培养8 h‑18h，直至试管中混合液只呈轻微浑浊停止培养，称之为菌液；（2）选择性增菌培养：移取步骤（1）所得各管中菌液0.1‑0.5mL加入到装有5mL四硫磺酸钠煌绿增菌液TTB的试管中，42℃培养18‑24h；（3）显色培养基分离鉴别：分别用接种环取步骤（2）所得各管中的菌液一环划线接种到亚硫酸铋琼脂BS平板上，36℃±1℃培养40h‑48h，观察各个平板上生长的菌落；（4）用MPN计数软件计算得出结果：根据生化鉴定结果，确定最大或然数MPN结果，用MPN Calculator软件计算得出污泥中最大可能的沙门氏菌浓度。