[发明专利]一种烟叶烘烤用微生物制剂生产工艺

摘要

本发明提供一种烟叶烘烤用改善烟叶工业可用性品质的微生物制剂生产工艺。属于微生物制剂生产工艺技术领域。其技术方案是使用“纯烟叶浸提液固体平板高温分离烟叶表面微生物的方法”分离的高温菌菌种，按3-5％的接种量接种于经121-126℃、0.11-0.13MPa下25-35分钟灭菌后降温致60℃，含8±5％(重量/体积)经粉碎处理的废弃烟叶和92±95％的自来水，不调节pH值的发酵培养基中，120-130rpm搅拌发酵48h，维持发酵温度在45-55℃。在发酵结束前2-4h，加入0.1％过滤除菌的硫酸锰，继续搅拌至发酵结束。放罐直接容器分装，密封。发酵液即为提供烟叶烘烤用的微生物制剂。该工艺制备的高温芽孢杆菌制剂大部分形成芽孢，可长期保存。环保无污染。

主权项

一种烟叶烘烤用微生物制剂生产工艺，其特征在于先直接用重量百分比W/W为10％±5％纯烟叶浸提的固体培养基，在50℃‑60℃培养温度下，分离筛选得到烟叶中本身自带的、具有活性的高温菌株——YN113、YN105、YN104、YN91，YN114菌株，然后再使用菌该菌生产微生物制剂，具体步骤是：A、将充分浸泡3‑5天废弃烟叶液作为烟叶浸提原液，以体积比计，烟叶浸提原液/自来水按5％‑15％的量(V/V)与琼脂(2.5g/100mL)混合，不另添加任何附加成分和调节pH值，在0.11‑0.13MPa下25‑35分钟高压灭菌后，倒双层平皿，制得纯烟叶浸提液固体平板；按常规将烟叶样品梯度稀释后，取0.2mL放入纯烟叶浸提液固体平板中，涂布均匀后置50℃‑60℃恒温箱培养至菌落出现，分离后得到在高温50℃‑60℃还具有生理活性的烟叶表面微生物菌株，制剂生产工艺的菌种；B、采用上述A步骤分离出的高温芽孢杆菌菌种，按体积比例，用3‑5％的接种量接种于在含8±5％(重量/体积)经粉碎处理的废弃烟叶和92±95％自来水，经121‑126℃、0.11‑0.13MPa下灭菌25‑35分钟的发酵培养基中，搅拌速度120‑130rpm，维持培养温度在45‑55℃，发酵时间40‑48h；在发酵结束前2h，按发酵液重量百分比比例，加入0.1％过滤除菌的硫酸锰，继续搅拌至发酵结束；发酵液放罐直接分装容器，密封；即为提供烟叶烘烤用的微生物制剂。