[发明专利]一种通过BMP15基因高效快速检测绵羊高繁殖性状的方法

摘要

本发明提供的一种通过BMP15基因高效快速检测绵羊高繁殖性状的方法，包括1)在策勒黑羊BMP15基因编码序列中新发现的一个SNP位点，位点位于Genebank序列，从BMP15基因序列的起始密码子ATG开始+755位点，发生T-C突变(简称T755C)；2)合成一对核苷酸序列作为检测T755C位点的引物，其正向引物：5′-gaagaccaaacctctccctaagg-3′；反向引物：5′-tactttcaggcccatcatgctcc-3′；上下游引物长度均为23bp，将其结合到绵羊BMP15基因相应的模板链上，并扩增到含有E+755位点的核酸序列；3)提取DNA，利用引物扩增PCR，将产物用2％琼脂糖凝胶电泳检测，用溴化乙锭染色，以凝胶成像确定已扩增的目的条带；4)利用限制性内切酶ApaI对PCR产物进行消化，酶切消化产物为120bp和140bp两条带时，表示个体具有高繁殖性能。

主权项

一种通过BMP15基因高效快速检测绵羊高繁殖性状的方法，其特征在于：包括1)在策勒黑羊BMP15基因编码序列中新发现的一个SNP位点，其位点位于Genebank序列(序列号为：NM_001114767.1)从BMP15基因序列的起始密码子ATG开始+755位点，发生了T→C突变(简称T755C)；2)人工合成一对核苷酸序列作为检测T755C位点的引物，其正向引物：5′‑gaagaccaaacctctccctaagg‑3′；反向引物：5′‑tactttcaggcccatcatgctcc‑3′；上下游引物长度均为23bp，将其结合到绵羊BMP15基因相应的模板链上，并扩增到含有E+755位点的核酸序列；3)提取DNA，利用引物扩增PCR，将产物用2％琼脂糖凝胶电泳检测，用溴化乙锭染色，以凝胶成像确定已扩增的目的条带；4)利用限制性内切酶ApaI对PCR产物进行消化，消化后用8％丙烯酰胺凝胶电泳，硝酸银染色，以凝胶成像鉴别该绵羊个体在T755C位点的基因型，将其不同的基因型作为绵羊高繁殖性状的分子标记，用于辅助选择育种；上步的T755C位点突变后，造成BMP15蛋白的结构和功能发生改变，显著改变了母羊的产羔数；上步酶切消化产物大小为140bp时，表示该个体没有高繁殖性能；酶切消化产物大小为120bp和140bp两条带时，表示该个体具有高繁殖性能。