[发明专利]富含多磷酸化多肽的酪蛋白水解物和制备方法无效
申请号: | 201010269516.8 | 申请日: | 2010-09-02 |
公开(公告)号: | CN101948524A | 公开(公告)日: | 2011-01-19 |
发明(设计)人: | 苏荣欣;齐崴;何志敏 | 申请(专利权)人: | 天津大学 |
主分类号: | C07K14/47 | 分类号: | C07K14/47;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/30;C07K1/18;C12P21/06 |
代理公司: | 天津市杰盈专利代理有限公司 12207 | 代理人: | 王小静 |
地址: | 300072*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | 本发明涉及富含多磷酸化多肽的酪蛋白水解物和制备方法。它是以酪蛋白为原料,采用蛋白水解酶进行适度水解,水解度控制在10%以内,沸水浴加热灭酶,采用5kDa超滤膜从反应体系中分离出各种产物多肽,再将该产物用1kDa的超滤膜进行截留,所得截留液采用钙-乙醇选择性沉淀磷酸肽,再将其用去离子水或挥发性盐溶液溶解,上样到强阳离子交换柱上,分离获得带多个磷酸化的多肽。采用喷雾干燥或冷冻干燥获得产品。最后采用液质联用对所得磷酸肽进行序列鉴定。本发明可选择性地获得具有更高活性的磷酸肽,在食品生物技术领域中具有良好的应用前景,并为磷酸蛋白质组学的研究提供很好的研究样品。 | ||
搜索关键词: | 富含 磷酸化 多肽 蛋白 水解 制备 方法 | ||
【主权项】:
一种富含多磷酸化多肽的酪蛋白水解物,其特征在于它是以酪蛋白为原料,采用蛋白水解酶进行适度水解,水解度需控制10%以内,沸水浴加热灭酶,采用5kDa超滤膜从反应体系中分离出各种产物多肽,再将该产物用1kDa的超滤膜进行截留,所得截留液采用钙‑乙醇选择性沉淀磷酸肽,再将其用去离子水或挥发性盐溶液溶解,上样到强阳离子交换柱上,分离获得带多个磷酸化的多肽,采用喷雾干燥或冷冻干燥获得产品。
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