[发明专利]甜高粱幼穗愈伤组织再生体系建立的方法有效
申请号: | 201010261937.6 | 申请日: | 2010-08-24 |
公开(公告)号: | CN101946706A | 公开(公告)日: | 2011-01-19 |
发明(设计)人: | 黄大昉;朱莉;郎志宏;李桂英 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院生物技术研究所 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 北京海虹嘉诚知识产权代理有限公司 11129 | 代理人: | 胡敬红 |
地址: | 100081 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明为“甜高粱幼穗愈伤组织再生体系建立的方法”,属植物基因工程技术领域,包括如下步骤:1)选取幼穗,旗叶期长约2-5cm幼穗,切成薄片,2)将其接种于诱导培养基中培养,形成愈伤组织,3)将愈伤幼穗组织块在继代培养基中继代培养,4)再将其接于分化培养基中培养至出苗,5)将苗移入生根培养基中培养出根,6)转移至小培养钵中炼苗培养,7)移栽至温室或大田。本发明利用甜高粱幼穗为外植体,采用特定的培养基成分,不同的培养条件对愈伤诱导,增殖,分化,直至得到再生植株,本发明方法能得到较高的愈伤组织诱导率,实验结果表明幼穗是建立甜高粱再生体系比较理想的一种外植体,可以用于进一步的转化研究。 | ||
搜索关键词: | 高粱 幼穗愈伤 组织 再生 体系 建立 方法 | ||
【主权项】:
甜高粱幼穗愈伤组织再生体系建立的方法,包括如下步骤:1)选取幼穗,旗叶期长约2‑5cm幼穗,切成薄片,2)将其接种于诱导培养基中培养,形成愈伤组织,所述诱导培养基为:MS基础培养基+2,4‑D 2mg/L+ZT 2.0mg/L+PVP 10mg/L+抗坏血酸10mg/L+水解酪蛋白500mg/L+30g/L蔗糖+7.2g/L琼脂pH 5.8,3)将愈伤幼穗组织块在继代培养基中继代培养,所述继代培养基为:诱导培养基+KT 0.2mg/L,4)再将其接于分化培养基中培养至出苗,所述分化培养基为:MS基础培养基+ZT 2.0mg/L+KT 0.2mg/L+PVP 8‑10mg/L+水解酪蛋白500mg/L+30g/L蔗糖+8.0g/L琼脂,pH 5.8,5)将苗移入生根培养基中培养出根,所述生根培养基为:1/2MS基础培养基+肌醇500mg/L+NAA 400mg/L+IBA 2mg/L+PVP8‑10mg/L+30g/L蔗糖+8.0g/L琼脂,pH 5.8,6)转移至小培养钵中炼苗培养,7)移栽至温室或大田。
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