[发明专利]一种利用牙签接种法鉴定番茄对番茄黄化曲叶病毒抗性的方法

摘要

本发明提供一种快速、简捷、有效的番茄黄化曲叶病毒抗性鉴定方法，属植物保护领域。番茄黄化曲叶病毒是一种烟粉虱传播的病毒，传统的抗性鉴定多采样烟粉虱接种鉴定法，而烟粉虱接种鉴定法由于受到烟粉虱的影响(如烟粉虱接种虫量、带毒率、取食特性等)，很难提供稳定一致的接种压力，同时还会受其它粉虱传病毒的干扰，从而导致鉴定结果准确性和重复性差。而牙签接种鉴定法很好的克服了这些问题，利用构建好的侵染性克隆，通过牙签刺伤韧皮部接种番茄黄化曲叶病毒，鉴定番茄材料对番茄黄化曲叶病毒的抗性，该方法无需饲养烟粉虱、操作简单、效率高、重复性好、可控性好，能提供相对一致的接种压力，结果准确，是一种简便有效的接种鉴定方法。

主权项

一种利用牙签接种法鉴定番茄对番茄黄化曲叶病毒抗性的方法，包括以下步骤：(1)将含有PTYj01的农杆菌接种含50mg/ml的卡那霉素(Kanamyein)和50mg/ml的利福平(Rifamycin)的YEP液体培养基中，28℃150rpm培养至OD600达到0.6‑0.8。(2)常规条件下育苗，2片真叶时移至一次性营养钵中，3‑4片叶时进行接种处理。(3)用牙签尖头蘸取菌液于3‑4叶期番茄茎杆韧皮部刺伤3‑4处(每刺伤1处蘸取菌液1次)，处理后的番茄于温室(温度为25‑28℃)内放置1‑2天，而后移置田间或者温室，观察发病情况。(4)15‑30天统计发病情况，计算发病率，评价番茄材料对番茄黄化曲叶病毒的抗性：发病率高的材料表现感病，发病率低的材料表现抗病。