[发明专利]一种盐酸克伦特罗磁微粒分离酶联免疫检测方法无效
申请号: | 201010245891.9 | 申请日: | 2010-08-05 |
公开(公告)号: | CN101907627A | 公开(公告)日: | 2010-12-08 |
发明(设计)人: | 韩学栋;韩子华;郭健夫;仝文斌 | 申请(专利权)人: | 北京倍爱康生物技术有限公司 |
主分类号: | G01N33/558 | 分类号: | G01N33/558;G01N33/577;G01N21/31 |
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摘要: | 本发明提供了一种盐酸克伦特罗(CLB)磁微粒分离酶联免疫定量检测方法,属于食品安全免疫检测技术领域。本发明采用竞争法的免疫检测原理,将CLB与生物酶连接制成酶标抗原试剂,将抗异硫氰酸荧光素(FITC)抗体吸附在磁微粒表面制成磁分离试剂,将FITC与抗CLB抗体连接制成抗试剂。样本中CLB与酶标CLB竞争结合少量的FITC标抗CLB抗体,形成抗原抗体复合物。加入磁分离试剂后,磁微粒表面连接的抗FITC抗体将复合物捕获到磁微粒表面。洗涤,最后加入底物并检测。本发明的优点在于:①以磁微粒代替传统酶标板作为固相载体,使免疫反应接近液相条件下进行,反应更充分和迅速,与传统ELISA方法比较,具有特异性高、重复性好的特点;②采用一步竞争法原理,检测用时短。 | ||
搜索关键词: | 一种 盐酸 克伦特罗磁 微粒 分离 免疫 检测 方法 | ||
【主权项】:
一种盐酸克伦特罗(CLB)磁微粒分离酶联免疫方法,其特征在于检测步骤为:(1)加样与免疫反应:在试管中加入20 200μl样本溶液、CLB校准品或CLB质控品,然后加入20 200μl酶标抗原试剂和20 200μl抗试剂。混匀后,37℃温育5 30分钟;(2)加磁分离试剂:在试管中加入20 100μl磁分离试剂,混匀后,37℃温育5 30分钟;(3)洗涤:使磁微粒在磁场中沉降,去上清,加入100 500μl清洗液,去除磁场,震荡使磁微粒充分混悬30秒,然后再次使磁微粒在磁场中沉降,去除上清液。如此重复2 4次;(4)加底物溶液:每管加入50 300μl生物酶催化的显色或发光底物,混匀后,37℃温育5 30分钟;(5)终止显色(仅适用于显色法):每管加入100 300μl终止液,并放在磁分离器上分离10分钟;(6)读值:在分光光度计或发光强度检测仪上读取吸光度或发光强度值;
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