[发明专利]一种盐酸克伦特罗磁微粒分离酶联免疫检测方法

权利要求书

1.一种盐酸克伦特罗(CLB)磁微粒分离酶联免疫方法，其特征在于检测步骤为：

(1)加样与免疫反应：在试管中加入20-200μl样本溶液、CLB校准品或CLB质控品，然后加入20-200μl酶标抗原试剂和20-200μl抗试剂。混匀后，37℃温育5-30分钟；

(2)加磁分离试剂：在试管中加入20-100μl磁分离试剂，混匀后，37℃温育5-30分钟；

(3)洗涤：使磁微粒在磁场中沉降，去上清，加入100-500μl清洗液，去除磁场，震荡使磁微粒充分混悬30秒，然后再次使磁微粒在磁场中沉降，去除上清液。如此重复2-4次；

(4)加底物溶液：每管加入50-300μl生物酶催化的显色或发光底物，混匀后，37℃温育5-30分钟；

(5)终止显色(仅适用于显色法)：每管加入100-300μl终止液，并放在磁分离器上分离10分钟；

(6)读值：在分光光度计或发光强度检测仪上读取吸光度或发光强度值；

2.根据权利要求1所述的抗试剂其特征在于：是抗CLB抗体与异硫氰酸荧光素(FITC)的共价连接物溶液。所述抗CLB抗体可以是单克隆抗体，也可以是多克隆抗体。其工作浓度为0.2-10μg/ml。

3.根据权利要求1所述的酶标抗原试剂，其特征在于：是盐酸克伦特罗与牛血清白蛋白(BSA)的共价连接物(CLB-BSA)进一步共价连接生物酶形成的连接物溶液。所述的生物酶可以是辣根过氧化物酶(HRP)，也可以是碱性磷酸酶(ALP)。生物酶与CLB-BSA的连接方法可以通过过碘酸钠氧化法，戊二醛法或Succinimidyl 4-(N-maleimidomethyl)cyclohexane-1-carboxylate(SMCC)、2-Iminothiolane·HCl(2IT)交联法等多种方法。其工作浓度为0.5-5μg/ml。