[发明专利]以贝壳基质为原料制备人工皮肤的方法

摘要

一种以贝壳基质为原料制备人工皮肤的方法，将贝壳经去角质层、盐酸和戊二醛混合溶液浸泡后得贝壳基质、贝壳基质于含明胶基底的培养皿中浸泡骨髓细胞悬液等一系列步骤制得。与报道的相关研究相比，具有材料来源丰富价廉物美的优点。同时，具有较低的免疫原性，可以为患者皮肤的修复提供种子，引导皮肤的重构和汗腺的形成。本人工皮肤具有可降解性，随着创面的修复，贝壳基质逐步被降解吸收，可避免清创过程中给患者所导致的痛苦。

主权项

一种以贝壳基质为原料制备人工皮肤的方法，其特征在于，依次通过下列步骤实现：(1)贝壳的准备取河蚌，去除内脏团和闭壳肌，40℃烘干，去角质层，沿贝壳外周去除5毫米宽度；(2)贝壳基质的制备将贝壳浸泡于v/v浓度为1 5％的盐酸和v/v浓度为5 20％的戊二醛混合溶液中，1周，磷酸盐缓冲溶液漂洗3次，每次2小时，75％医用酒精浸泡2分钟，得贝壳基质，置于磷酸盐缓冲溶液密封保存备用；(3)骨髓间充质干细胞的准备常规方法取骨髓1毫升，流式细胞仪分离骨髓间充质干细胞，置于含v/v浓度为10％胎牛血清的DMEM培养基中培养，常规方法制成细胞悬液；(4)人工皮肤的制备将步骤(2)所得贝壳基质置于含明胶基底的培养皿中，展平，胎牛血清表衬8 12小时，加入细胞浓度为1×106 1×107/ml的步骤(3)所得细胞悬液，至淹没贝壳基质为止，培养12小时，沿培养皿边缘吸出培养基，添加DMEM培养基至淹没贝壳基质，每隔3天换液一次，培养至15 20天为止，得人工皮肤。