[发明专利]1,4-二[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸酯对照品的制备方法

摘要

本发明涉及一种1，4-二[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸酯对照品的制备方法。该方法是将白及药材粉碎成粗粉，乙醇提取，回收乙醇，浓缩液加水稀释，经大孔吸附树脂柱富集，乙醇-水解吸附，回收乙醇，得到浓缩液，浓缩液加入硅胶混合均匀，干燥成粉，以氯仿-甲醇洗脱，得到1，4-二[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸酯粗品，粗品进行凝胶柱层析，得到1，4-二[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸酯精品，再经制备型反相硅胶柱层析，甲醇-水洗脱，得到1，4-二[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸酯对照品。经高效液相色谱法检测，1，4-二[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸酯的含量可达到98％以上，该方法成本较低，步骤简单，专属性强。

主权项

一种1，4-二[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸酯对照品的制备方法，包括以下步骤：(1)将白及药材粉碎成粗粉，按照白及粗粉∶溶剂＝1∶4～20(重量)的比例，回流提取1～8小时，滤液回收溶剂，得到流浸膏，其中所述溶剂为甲醇或乙醇，浓度为30～80％；(2)将上述白及流浸膏加水稀释，白及流浸膏∶水＝1∶4～10(重量)，稀释液经大孔吸附树脂柱富集，以20～80％乙醇为解吸附剂进行洗脱，收集洗脱液，回收溶剂，得到浓缩液，加硅胶混合均匀，硅胶加入量按白及粗粉∶硅胶＝1∶0.02～0.1(重量)计，室温干燥，得到干燥粉末；(3)将上述干燥粉末转入层析柱，依次以不同比例氯仿-甲醇为洗脱剂进行洗脱，氯仿∶甲醇＝1∶0～0.2、1∶0.2～0.4、1∶0.5～0.9(体积)，依次收集洗脱液，薄层层析检识，合并1，4-二[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸酯组分，回收溶剂，得到1，4-二[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸酯粗品；(4)将上述1，4-二[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸酯粗品进行凝胶柱层析，甲醇或水为洗脱剂进行洗脱，收集洗脱液，薄层层析检识，合并1，4-二[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸酯组分，回收溶剂，得到1，4-二[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸酯精品；(5)将上述1，4-二[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸酯精品进行反相硅胶柱层析，以甲醇-水洗脱，甲醇占水的30～70％(体积)，收集洗脱液，经高效液相检测，将纯度≥98％的1，4-二[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸酯组分合并，回收溶剂，得到1，4-二[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸酯对照品。