[发明专利]检测犬猫钩端螺旋体的荧光定量PCR方法及其引物和检测试剂盒无效

专利信息
申请号: 201010138082.8 申请日: 2010-04-01
公开(公告)号: CN101935696A 公开(公告)日: 2011-01-05
发明(设计)人: 丁铲;陈鸿军;于圣青;宋翠萍;仇旭升;胡青海;韩先干 申请(专利权)人: 中国农业科学院上海兽医研究所
主分类号: C12Q1/68 分类号: C12Q1/68;C12Q1/04;G01N21/64;C12N15/11
代理公司: 上海百一领御专利代理事务所(普通合伙) 31243 代理人: 马育麟
地址: 200241 *** 国省代码: 上海;31
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摘要: 发明提供检测犬猫钩端螺旋体的荧光定量PCR方法及其引物和检测试剂盒,其采用16s rRNA基因序列为设计引物,上游引物:5’-ACGAAAGCGTGGGTAGTG-3’;下游引物:5’-GCGGTCTACTTAATCCGT-3’。本发明基于16s rRNA基因建立了鉴定犬猫钩端螺旋体的SYBR Green I荧光定量PCR方法。在最佳反应条件下反应效率为0.98,获得的标准曲线相关系数R值达1.000,标准曲线的线性范围达到1~1×107拷贝8个数量级,最低可检测到约1个目的拷贝,即1.2fg DNA。本发明建立的SYBR Green I荧光定量方法具有特异性强、灵敏度高、定量范围广的特点。
搜索关键词: 检测 犬猫钩端 螺旋体 荧光 定量 pcr 方法 及其 引物 试剂盒
【主权项】:
检测犬猫钩端螺旋体的荧光定量PCR方法,其特征在于,其16s rRNA基因序列为设计引物,上游引物:5’‑ACGAAAGCGTGGGTAGTG‑3’;下游引物:5’‑GCGGTCTACTTAATCCGT‑3’,扩增片段长度为119bp。
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