[发明专利]检测犬猫钩端螺旋体的荧光定量PCR方法及其引物和检测试剂盒无效
申请号: | 201010138082.8 | 申请日: | 2010-04-01 |
公开(公告)号: | CN101935696A | 公开(公告)日: | 2011-01-05 |
发明(设计)人: | 丁铲;陈鸿军;于圣青;宋翠萍;仇旭升;胡青海;韩先干 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院上海兽医研究所 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12Q1/04;G01N21/64;C12N15/11 |
代理公司: | 上海百一领御专利代理事务所(普通合伙) 31243 | 代理人: | 马育麟 |
地址: | 200241 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明提供检测犬猫钩端螺旋体的荧光定量PCR方法及其引物和检测试剂盒,其采用16s rRNA基因序列为设计引物,上游引物:5’-ACGAAAGCGTGGGTAGTG-3’;下游引物:5’-GCGGTCTACTTAATCCGT-3’。本发明基于16s rRNA基因建立了鉴定犬猫钩端螺旋体的SYBR Green I荧光定量PCR方法。在最佳反应条件下反应效率为0.98,获得的标准曲线相关系数R值达1.000,标准曲线的线性范围达到1~1×107拷贝8个数量级,最低可检测到约1个目的拷贝,即1.2fg DNA。本发明建立的SYBR Green I荧光定量方法具有特异性强、灵敏度高、定量范围广的特点。 | ||
搜索关键词: | 检测 犬猫钩端 螺旋体 荧光 定量 pcr 方法 及其 引物 试剂盒 | ||
【主权项】:
检测犬猫钩端螺旋体的荧光定量PCR方法,其特征在于,其16s rRNA基因序列为设计引物,上游引物:5’‑ACGAAAGCGTGGGTAGTG‑3’;下游引物:5’‑GCGGTCTACTTAATCCGT‑3’,扩增片段长度为119bp。
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