[发明专利]用胶体金免疫层析试验检测伏马毒素的方法无效
申请号: | 200910307796.4 | 申请日: | 2009-09-27 |
公开(公告)号: | CN101661043A | 公开(公告)日: | 2010-03-03 |
发明(设计)人: | 严亚贤;王君;王元凯;孙建和 | 申请(专利权)人: | 上海交通大学 |
主分类号: | G01N33/577 | 分类号: | G01N33/577 |
代理公司: | 上海交达专利事务所 | 代理人: | 王锡麟;王桂忠 |
地址: | 200240*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 一种生物检测工程技术领域的用胶体金免疫层析试验快速检测伏马毒素的方法,包括如下步骤:将伏马毒素半抗原通过戊二醛法分别与KLH和OVA偶联;利用所得伏马毒素-KLH偶联物,采用常规方法制备抗伏马毒素的单克隆抗体;用柠檬酸三钠还原法制备40nm的胶体金,用该胶体金标记经过透析除盐处理的抗伏马毒素的单克隆抗体;将得到的单克隆抗体蛋白喷涂到金标垫上,将伏马毒素-OVA偶联物喷涂到T线,兔抗鼠的单克隆抗体喷涂到C线,组装成试纸条,干燥;将待测样品用甲醇提取,离心,取上清,将上清滴入试纸条的样本槽中,获取T线和C线的显色,鉴定,得到结果。本发明的方法检测特异性强,准确率高;检测速度快,所需时间短,只需5~10分钟。 | ||
搜索关键词: | 胶体 免疫 层析 试验 检测 毒素 方法 | ||
【主权项】:
1、一种用胶体金免疫层析试验快速检测伏马毒素的方法,其特征在于,包括如下步骤:步骤一,将伏马毒素半抗原通过戊二醛法分别与KLH和OVA偶联;步骤二,利用步骤一所得伏马毒素KLH偶联物,采用常规方法制备抗伏马毒素的单克隆抗体;步骤三,用柠檬酸三钠还原法制备40nm的胶体金,用该胶体金标记经过透析除盐处理的抗伏马毒素的单克隆抗体;步骤四,将步骤三得到的单克隆抗体蛋白喷涂到金标垫上,将伏马毒素-OVA偶联物喷涂到T线,兔抗鼠的单克隆抗体喷涂到C线,组装成试纸条,干燥;步骤五,将待测样品用甲醇提取,离心,取上清,将上清滴入试纸条的样本槽中,获取T线和C线的显色,鉴定,得到结果。
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