[发明专利]一种建立急性多型性卟啉病转基因小鼠模型的方法有效
| 申请号： | 200910217442.0 | 申请日： | 2009-12-28 |
| 公开（公告）号： | CN101942463A | 公开（公告）日： | 2011-01-12 |
| 发明（设计）人： | 高旭;周凌云;惠洋;马宁;彭亚会 | 申请（专利权）人： | 哈尔滨医科大学 |
| 主分类号： | C12N15/52 | 分类号： | C12N15/52;C12N15/89;C12N15/90;C12Q1/68;C12Q1/25;A01K67/027 |
| 代理公司： | 北京科龙寰宇知识产权代理有限责任公司 11139 | 代理人： | 孙皓晨 |
| 地址： | 150001 黑龙*** | 国省代码： | 黑龙江;23 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种建立急性多型性卟啉病转基因小鼠模型的方法。本发明首先构建一线性转基因序列，利用构建的基因序列产生F0代转基因小鼠，该小鼠基因组中整合有外源性ALAS-E表达序列，将获得的阳性转基因小鼠与正常小鼠杂交，获得子代。本发明能够自发产生一系列典型的急性多型性卟啉病的生化、病理和临床特征，并首次出现ALA高而血红素不低的状态，完善了急性多型性卟啉病的病因，可作为急性多型性卟啉病动物模型用于急性卟啉病发病机制研究。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 建立 急性 多型性 卟啉 转基因 小鼠 模型 方法 | ||
【主权项】：
一种建立急性多型性卟啉病转基因小鼠模型的方法，其特征在于它包括以下步骤：1)构建一线性转基因序列，该序列从5’至3’依次含有chicken β‑actin启动子，CMV增强子，ALAS‑E(ALAS‑2)cDNA编码序列，终止信号rabbitβ‑globin poly(A)sequence；2)应用显微注射方法将构建的基因序列注入小鼠受精卵；3)将步骤2)中的受精卵植入假孕鼠的输卵管；4)产生F0代转基因小鼠，该小鼠基因组中整合有外源性ALAS‑E表达序列；5)对步骤4)获得的转基因小鼠进行鉴定；6)将获得的阳性转基因小鼠与正常小鼠杂交，获得子代；7)对转基因小鼠和正常小鼠的ALAS‑E的mRNA水平、蛋白水平以及酶活性进行比较；8)按照急性多型性卟啉病的生化、病理、临床特征对ALAS‑E过表达转基因小鼠进行鉴定。
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