[发明专利]一种活性氮致内皮细胞损伤的药物筛选方法及应用无效
申请号: | 200910152760.3 | 申请日: | 2009-09-28 |
公开(公告)号: | CN101654698A | 公开(公告)日: | 2010-02-24 |
发明(设计)人: | 韩峰;楼宜嘉;刘启兵;刘璐璐 | 申请(专利权)人: | 浙江大学 |
主分类号: | C12Q1/02 | 分类号: | C12Q1/02;C12N5/08;C12N5/06 |
代理公司: | 杭州求是专利事务所有限公司 | 代理人: | 张法高;赵杭丽 |
地址: | 310027浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明公开了一种活性氮致内皮细胞损伤的药物筛选方法,通过采用外源性的活性氮诱导物,以一定的浓度加入到体外培养的内皮细胞中,作用一定时间,造成内皮细胞的损伤,建立一种活性氮损伤内皮细胞的模型。利用该细胞模型,加入不同的药物,通过观察相应的ROS、3-NT生成的情况,细胞的存活率作为靶点,体外筛选可减轻活性氮对内皮细胞损伤的药物。本发明避免了细胞整体水平筛选的盲目性,减少了工作量且药物作用机制明确,具有直接,快速和简便的优点,适合大规模的心脑血管候选药物筛选。 | ||
搜索关键词: | 一种 活性 内皮 细胞 损伤 药物 筛选 方法 应用 | ||
【主权项】:
1.一种活性氮致内皮细胞损伤的药物筛选方法,通过以下步骤实现:将外源性的活性氮诱导物质加入到内皮细胞生长的培养基中,活性氮自然产生,与活性氧结合并作用于内皮细胞,引起线粒体损伤,凋亡早期活性氧的生成,蛋白酪氨酸硝基化及凋亡,得到活性氮损伤内皮细胞模型,以凋亡早期活性氧,蛋白酪氨酸硝基化产生,细胞存活率明显降低的确切特征性标志作为建模评价标准。
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