[发明专利]一种扩增低含量基因突变DNA的引物设计方法及其应用

摘要

一种扩增低含量基因突变DNA的引物设计方法，涉及一种DNA扩增技术。本发明所提供的引物，可分为四个区域，从5′端到3′端分别为GC区、5′端配对区、3A区、3′端突变配对区。其特征在于：每对所述引物对中的一条引物的5′末端均加有一段与待扩增靶序列无关的寡核苷酸尾，离3′末端的第5～8个寡核苷酸处插入3个A碱基片段，突变位置放在3′末端1-4位。本发明的引物设计方法能够有效的在较高野生型DNA背景时突变基因DNA含量较低的情况下特异扩增目的产物，可进行单重或多重PCR扩增，在核酸检测中可以得到广泛应用。

主权项

1、一种扩增低含量基因突变DNA的引物设计方法，首先设计一对靶序列基本扩增引物，然后在每对所述引物对中的一条引物的5′末端加一段与待扩增靶序列无关的GC寡核苷酸尾，离3′末端的第5~8个寡核苷酸处插入3个A碱基片段，突变位置放在3′末端1-4位。