[发明专利]棉花染色体分离方法有效
| 申请号： | 200910083302.9 | 申请日： | 2009-04-30 |
| 公开（公告）号： | CN101724624A | 公开（公告）日： | 2010-06-09 |
| 发明（设计）人： | 王为;王坤波;彭仁海;宋国立;王春英;刘方;黎绍惠;张香娣;王玉红 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院棉花研究所 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10;C12P19/34 |
| 代理公司： | 北京法思腾知识产权代理有限公司 11318 | 代理人： | 高宇 |
| 地址： | 455000 *** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | 本发明属于分子细胞遗传学领域，具体涉及棉花染色体分离方法，所述方法包括以下步骤：取材及预处理、前低渗、酶解、后低渗、染色及压片、揭盖片、染色体的显微分离以及收集染色体。根据本发明的方法采用前低渗、酶解、后低渗和压片法结合进行染色体膜制片的准备，细胞壁完全去除干净，染色体经轻压后分散良好，形态清晰，利于目标染色体的识别。 | ||
| 搜索关键词： | 棉花 染色体 分离 方法 | ||
【主权项】：
棉花染色体分离方法，其特征在于，包括以下步骤：1)取材及预处理，取种子在温水中浸泡6～12h，然后暗培养，待根长至1～2cm时，截取根尖以放线菌酮处理，将预处理过的根尖置于卡诺固定液中固定；2)前低渗，滴加无菌双蒸水冲洗固定过的根尖，在4℃蒸馏水中前低渗15～20min；3)酶解，切取前低渗过的根尖2～3mm于混合酶解液中酶解，所述混合酶解液含4％的纤维素酶、和1％的果胶酶；4)后低渗，吸除酶解液，滴加无菌双蒸水冲洗根尖，4℃蒸馏水中后低渗15～20min；5)染色及压片；6)揭盖片；7)染色体的显微分离，找到目标染色体，然后进行切割；8)收集染色体。
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