[发明专利]以肿瘤细胞miR-221/222为药靶的抗癌重组腺病毒和构建方法及用途无效
| 申请号： | 200910067879.0 | 申请日： | 2009-02-18 |
| 公开（公告）号： | CN101503685A | 公开（公告）日： | 2009-08-12 |
| 发明（设计）人： | 康春生;张春智;浦佩玉;王广秀;贾志凡;张安玲;韩磊 | 申请（专利权）人： | 天津医科大学总医院 |
| 主分类号： | C12N15/11 | 分类号： | C12N15/11;C12N15/79;C12N15/861;C12N7/01;A61K48/00;A61P35/00 |
| 代理公司： | 天津佳盟知识产权代理有限公司 | 代理人： | 侯 力 |
| 地址： | 300052*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种应用遗传工程的方法在细胞内获得靶向敲低miRNA表达的构建方案，以及用该方案获取的重组腺病毒和真核表达质粒在肿瘤治疗药物制备中的用途。用定向克隆、同源重组、转染、腺病毒纯化等技术，获得重组腺病毒和真核表达质粒，即在多克隆位点下游分别插入针对人源性和小鼠源性U6启动子，在U6启动子下游连接反义的miR-221和miR-222成熟序列片断(序列表中的序列1至4)，所获得重组腺病毒和真核表达质粒能选在胶质瘤、胃癌、乳腺癌等肿瘤细胞内复制增殖；插入的反义miR-221/222cDNA片段在肿瘤细胞内高效表达，抑制肿瘤细胞miR-221/222的表达；对肿瘤细胞具有强效旁观者效应。该腺病毒和真核表达质粒在肿瘤治疗药物、放射治疗增敏的制备中具有独特的实用价值。 | ||
| 搜索关键词： | 肿瘤 细胞 mir 221 222 抗癌 重组 病毒 构建 方法 用途 | ||
【主权项】：
1、一种用于产生siRNA的DNA序列组，包括如下四个序列：DNA序列15‘-CTCGAGTTTATTAGCTCAAAAAAGAAACCCAGCAGACAATGTAGCT-3’DNA序列25’-CTCGAGTTTATTAGCTCAAAAAAGAAACCCAGCAGACAATGTAGCT-3｀DNA序列35′-CACCGGATCCATTGTCTGCTGGGTTTCTTTTTTGAATAAAGAGCTC-3’DNA序列45’-CTCGAGTTTATTAGCTCAAAAAAGAAACCCACAGACAATGGATCC-3’。
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