[发明专利]一种高稳定性的重组羧肽酶B的生产及应用有效
申请号: | 200910055492.3 | 申请日: | 2009-07-28 |
公开(公告)号: | CN101967467A | 公开(公告)日: | 2011-02-09 |
发明(设计)人: | 冯矗;赵致 | 申请(专利权)人: | 上海雅心生物技术有限公司 |
主分类号: | C12N9/48 | 分类号: | C12N9/48;C12N15/70;C07K14/47;C12N15/12;C12R1/19 |
代理公司: | 上海专利商标事务所有限公司 31100 | 代理人: | 陈静;范征 |
地址: | 200231 上海市嘉定*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明涉及一种高稳定性的重组羧肽酶B的生产及应用。公开了一种生产重组羧肽酶B的方法,所述方法包括:(1)重组表达N端带有突变的前导序列的羧肽酶B,获得包涵体形式的重组蛋白;(2)将包涵体形式的重组蛋白进行变性和复性,获得可溶性重组蛋白;和(3)切除所述可溶性重组蛋白N端带有前导序列的羧肽酶B的前导序列,获得重组羧肽酶B。本发明采用一种分子内分子伴侣提高了羧肽酶B的体外折叠,获得的重组羧肽酶B稳定性高,可良好地抗胰蛋白酶酶解。 | ||
搜索关键词: | 一种 稳定性 重组 羧肽酶 生产 应用 | ||
【主权项】:
一种生产重组羧肽酶B的方法,其特征在于,所述方法包括:(1)重组表达N端带有突变的前导序列的羧肽酶B,获得包涵体形式的重组蛋白;(2)将步骤(1)获得的包涵体形式的重组蛋白进行变性和复性,获得可溶性重组蛋白;和(3)切除所述步骤(2)获得的可溶性重组蛋白N端带有突变的前导序列的羧肽酶B的前导序列,获得重组羧肽酶B。
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