[发明专利]一种三维转移性肝癌类组织体外模型的构建方法无效
申请号: | 200910048099.1 | 申请日: | 2009-03-24 |
公开(公告)号: | CN101508973A | 公开(公告)日: | 2009-08-19 |
发明(设计)人: | 崔杰峰;刘银坤;唐建华;陈荣新;徐长德;康晓楠;郭坤 | 申请(专利权)人: | 复旦大学附属中山医院 |
主分类号: | C12N5/08 | 分类号: | C12N5/08 |
代理公司: | 上海申汇专利代理有限公司 | 代理人: | 翁若莹 |
地址: | 200032*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明提供了一种三维转移性肝癌类组织体外模型的构建方法,其特征在于,具体步骤为:将高转移人肝癌细胞系MHCC97H在RWV生物反应器与生物支架PLGA(聚乙醇酸-乳酸共聚物)结合的三维旋转培养体系中连续培养15天形成转移性肝癌类组织体模型,其在组织形态结构、特异基因表达、蛋白分泌情况等方面具有更接近体内转移性肝癌组织的特征,较好地模拟和再现体内转移性肝癌实体瘤的生长特征及病理改变,显示出优于平板培养的高转移人肝癌细胞系模型。 | ||
搜索关键词: | 一种 三维 转移性 肝癌 组织 体外 模型 构建 方法 | ||
【主权项】:
1、一种三维转移性肝癌类组织体外模型的构建方法,其特征在于,具体步骤为:第一步:将DMEM/F12培养液、胎牛血清和青链霉素溶液以体积比为100∶10∶1的比例混合得到混合培养液;第二步:将1 x 107高转移人肝癌细胞MHCC97H混悬在10ml第一步获得的混合培养液中,随后置入10ml的RWV生物反应器中,并置入生物可降解支架聚乙醇酸-乳酸共聚物,先静止10min再以速度7rpm/min~8rpm/min旋转培养10~15min,重复三次,然后静止30分钟,后以速度7rpm/min~8rpm/min旋转培养过夜,次日根据细胞团块的大小调节旋转培养速度,以悬浮在一个水平位置且不触及RWV反应器壁为宜,每36小时更换一次培养液,培养15天,得到类组织体。
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