[发明专利]一种三维转移性肝癌类组织体外模型的构建方法无效
| 申请号: | 200910048099.1 | 申请日: | 2009-03-24 |
| 公开(公告)号: | CN101508973A | 公开(公告)日: | 2009-08-19 |
| 发明(设计)人: | 崔杰峰;刘银坤;唐建华;陈荣新;徐长德;康晓楠;郭坤 | 申请(专利权)人: | 复旦大学附属中山医院 |
| 主分类号: | C12N5/08 | 分类号: | C12N5/08 |
| 代理公司: | 上海申汇专利代理有限公司 | 代理人: | 翁若莹 |
| 地址: | 200032*** | 国省代码: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 三维 转移性 肝癌 组织 体外 模型 构建 方法 | ||
1.一种三维转移性肝癌类组织体外模型的构建方法,其特征在于,具体步骤为:
第一步:将DMEM/F12培养液、胎牛血清和青链霉素溶液以体积比为100∶10∶1的比例混合得到混合培养液;
第二步:将1x107高转移人肝癌细胞MHCC97H混悬在10ml第一步获得的混合培养液中,随后置入10ml的RWV生物反应器中,并置入生物可降解支架聚乙醇酸-乳酸共聚物,先静止10min再以速度7rpm~8rpm旋转培养10~15min,重复三次,然后静止30分钟,后以速度7rpm~8rpm旋转培养过夜,次日根据细胞团块的大小调节旋转培养速度,以悬浮在一个水平位置且不触及RWV反应器壁为宜,每36小时更换一次培养液,培养15天,得到类组织体。
2.如权利要求1所述的一种三维转移性肝癌类组织体外模型的构建方法,其特征在于,所述的青链霉素溶液是将青霉素和链霉素溶于0.85g/100ml氯化钠溶液中得到,所述的青霉素的浓度是10000单位/ml,所述的链霉素的浓度是10000单位/ml。
3.如权利要求1所述的一种三维转移性肝癌类组织体外模型的构建方法,其特征在于,所述生物可降解支架聚乙醇酸-乳酸共聚物的长、宽和高分别为3~4mm、3~4mm和0.8~1.2mm。
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