[发明专利]一种三维转移性肝癌类组织体外模型的构建方法无效

专利信息
申请号: 200910048099.1 申请日: 2009-03-24
公开(公告)号: CN101508973A 公开(公告)日: 2009-08-19
发明(设计)人: 崔杰峰;刘银坤;唐建华;陈荣新;徐长德;康晓楠;郭坤 申请(专利权)人: 复旦大学附属中山医院
主分类号: C12N5/08 分类号: C12N5/08
代理公司: 上海申汇专利代理有限公司 代理人: 翁若莹
地址: 200032*** 国省代码: 上海;31
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摘要:
搜索关键词: 一种 三维 转移性 肝癌 组织 体外 模型 构建 方法
【权利要求书】:

1.一种三维转移性肝癌类组织体外模型的构建方法,其特征在于,具体步骤为:

第一步:将DMEM/F12培养液、胎牛血清和青链霉素溶液以体积比为100∶10∶1的比例混合得到混合培养液;

第二步:将1x107高转移人肝癌细胞MHCC97H混悬在10ml第一步获得的混合培养液中,随后置入10ml的RWV生物反应器中,并置入生物可降解支架聚乙醇酸-乳酸共聚物,先静止10min再以速度7rpm~8rpm旋转培养10~15min,重复三次,然后静止30分钟,后以速度7rpm~8rpm旋转培养过夜,次日根据细胞团块的大小调节旋转培养速度,以悬浮在一个水平位置且不触及RWV反应器壁为宜,每36小时更换一次培养液,培养15天,得到类组织体。

2.如权利要求1所述的一种三维转移性肝癌类组织体外模型的构建方法,其特征在于,所述的青链霉素溶液是将青霉素和链霉素溶于0.85g/100ml氯化钠溶液中得到,所述的青霉素的浓度是10000单位/ml,所述的链霉素的浓度是10000单位/ml。

3.如权利要求1所述的一种三维转移性肝癌类组织体外模型的构建方法,其特征在于,所述生物可降解支架聚乙醇酸-乳酸共聚物的长、宽和高分别为3~4mm、3~4mm和0.8~1.2mm。

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