[发明专利]用于快速筛选和鉴定有效shRNA的载体及其筛选和鉴定方法有效
| 申请号： | 200910044738.7 | 申请日： | 2009-11-11 |
| 公开（公告）号： | CN102051371A | 公开（公告）日： | 2011-05-11 |
| 发明（设计）人： | 易银沙;吕媛;孙永林;袁炳秋 | 申请（专利权）人： | 湖南师范大学 |
| 主分类号： | C12N15/79 | 分类号： | C12N15/79;C12Q1/68;C12Q1/02;G01N21/64 |
| 代理公司： | 长沙正奇专利事务所有限责任公司 43113 | 代理人： | 卢宏 |
| 地址： | 410000*** | 国省代码： | 湖南;43 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种快速筛选和鉴定有效shRNA真核表达载体，将如下结构构建至同一个真核表达载体上：1)由polIII型启动子调控的shRNA表达框结构，即polIII型启动子+shRNA插入位点；2)由CMV启动子调控的荧光蛋白表达框，并在荧光蛋白基因后面紧跟一个多克隆位点(MCS)；3)由SV40启动子调控的荧光蛋白表达框，该荧光蛋白的荧光颜色与第2)中的荧光蛋白的荧光颜色不同。本发明还提供了用上述载体筛选或验证有效shRNA的方案，利用此载体和方法筛选和鉴定有效shRNA，不需做RT-PCR或Western-blot检测，快速、简单、方便、成本低廉，特别适合于从多个预先设计的备选shRNA中筛选有效shRNA。 | ||
| 搜索关键词： | 用于 快速 筛选 鉴定 有效 shrna 载体 及其 方法 | ||
【主权项】：
用于快速筛选和鉴定有效shRNA的真核表达载体，其特征在于，将如下结构构建至同一个真核表达载体上：1)由polIII型启动子调控的shRNA表达框结构，即polIII型启动子+shRNA插入位点；2)由CMV启动子调控的荧光蛋白表达框，并在荧光蛋白基因后面紧跟一个多克隆位点(MCS)；3)由SV40启动子调控的荧光蛋白表达框，该荧光蛋白的荧光颜色与第2)中的荧光蛋白的荧光颜色不同。
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