[发明专利]用于多糖的定性与定量分析方法

摘要

用于多糖的定性与定量分析方法，(1)多糖的酶解及验证：多糖水溶液以比色法测定含量；(2)经HPSEC-ELSD分析，比较酶解前、后多糖图谱的变化；(3)多糖酶解液中糖类成分直接HPLC分析或柱前衍生化后HPLC分析；以标准单糖、糖醛酸、双糖等为对照和以色谱峰质荷比为参比，进行糖谱色谱峰识别；其稳定的特征片段，则用作定量分析指标；(4)通过上述各步骤的独立或联合应用，构建基于结构信息的多糖酶解响应特征和多糖酶解糖谱，实现对多糖的定性、定量分析。此法可用于人参、三七、西洋参、冬虫夏草、蛹虫草、赤芝、紫芝、黄芪和当归等中药多糖的鉴别和定量测定，为多糖及其产品的质量控制提供了有效的方法。

主权项

1、一种用于多糖的定性与定量分析方法，其特征在于，步骤如下：(1)、多糖的酶解及验证：多糖水溶液以比色法测定含量，调节糖含量，平行准备若干份多糖溶液，分别加入适量糖苷酶进行酶解，每个酶解反应重复3～5次；(2)、多糖酶解分析：多糖水溶液及其酶解物经HPSEC-ELSD分析，比较酶解前、后多糖图谱的变化；多糖图谱酶解前、后未发生明显变化记为阴性(-)响应；图谱中有特征峰的消失、减小，或者新色谱峰的出现则记为阳性(+)响应；(3)、糖谱分析：多糖酶解液中酶解残留片段和/或生成的寡糖及单糖，用反相HPLC-ELSD直接分析获得糖谱；或通过柱前衍生化，改善糖类成分在反相柱上的分离效果和紫外吸收特性，提高紫外检测和质谱检测的灵敏度，进而提高定性、定量的准确性；以标准单糖、糖醛酸、双糖等为对照和以色谱峰质荷比为参比，进行糖谱色谱峰识别；其稳定的特征片段，则用作定量分析指标；(4)、通过上述各步骤的独立或联合应用，构建基于结构信息的多糖酶解响应特征和多糖酶解糖谱，实现对多糖的定性、定量分析。