[发明专利]利用稻米制备富含L-色氨酸发酵液的方法

摘要

本发明涉及一种利用稻米制备富含L-色氨酸发酵液的方法，应用于制备L-色氨酸发酵液。它包括(1)制备双酶葡萄糖液工序，此工序包括利用高温淀粉酶、高效糖化酶把稻米浆料酶解糖化；(2)制备种子培养物工序，此工序包括(2.1)将(1)工序所得双酶葡萄糖液按重量分成X、Y、Z三部分，各部分比例为X∶Y∶Z＝1∶4∶95；X作为种子培养基所需要的糖液，Y作为发酵培养基所需要的糖液，Z作为流加糖所需要的糖液；(2.2)常规制作含X量双酶葡萄糖液的种子培养基，并将它均分为二：一部分作为重组大肠杆菌种子培养基；另一部分作为谷氨酸棒杆菌种子培养基；(3)利用种子培养物进行流加糖发酵工序。具有提高产酸水平和收率，缩短发酵周期，节省能耗的优点。

主权项

1、一种利用稻米制备富含L-色氨酸发酵液的方法，其特征是包括下述三个工序：(1)、制备双酶葡萄糖液工序，此工序依序包括：(1.1)将稻米温水浸泡后在带有磨砂轮的磨机作用下制成浆料；(1.2)按施酶的条件相继利用高温淀粉酶、高效糖化酶把浆料酶解糖化；(1.3)当浆料糖化至产糖最高峰时开始灭酶；(1.4)然后再加入粉末活性炭脱色以及珍珠岩粉絮凝，静止30min后经常规过滤得到双酶葡萄糖液；(2)、制备种子培养物工序，此工序包括：(2.1)将(1)工序所得双酶葡萄糖液按重量分成X、Y、Z三部分，各部分比例为X∶Y∶Z＝1∶4∶95；X作为种子培养基所需要的糖液，Y作为发酵培养基所需要的糖液，Z作为流加糖所需要的糖液；(2.2)常规制作含有上述X量双酶葡萄糖液的种子培养基，并将它均分两部分：一部分作为重组大肠杆菌种子培养基；另一部分作为谷氨酸棒杆菌种子培养基；(2.3)将1％的斜面重组大肠杆菌原种接入重组大肠杆菌种子培养基，维持温度36℃，在可见光660纳米波长采用752分光光度计测培养基液的光密度，至光密度≥15时可以移种；间隔时差8小时后，将1％的谷氨酸棒杆菌原种接入谷氨酸棒杆菌种子培养基，维持温度36℃，在可见光660纳米波长采用752分光光度计测培养基液的光密度，至光密度≥15时可以移种；(3)、利用种子培养物进行流加糖发酵工序，此工序包括：(3.1)将作为发酵培养基所需要糖液用的双酶葡萄糖液加入发酵罐，并在罐内常规制作发酵培养基；(3.2)通过冷却水冷却发酵罐维持发酵培养基的温度为35℃，通过向培养基补加液态氨维持培养基PH值6.0～6.5；按发酵罐内发酵培养基双酶葡萄糖液体积的10％接种量先后间隔8h移入(2)所得的重组大肠杆菌培养基液和谷氨酸棒杆菌培养基液；(3.3)之后，通过流加方式添加流加糖，以始终维持发酵罐内培养基的葡萄糖浓度2％【M/V】，至直流加糖量用的双酶葡萄糖液加完为止即得富含L-色氨酸的发酵液。