[发明专利]菜豆荚斑驳病毒的检测试剂盒及其检测方法

摘要

本发明涉及菜豆荚斑驳病毒的检测试剂盒及其检测方法，它专用于菜豆荚斑驳病毒的检测。该试剂盒包括引物、病毒抽提试剂、RT Buffer、RNA酶抑制因子、反转录酶、dNTPs、PCR Buffer、Mgcl₂、Taq DNA聚合酶、阳性对照、阴性对照、PBST缓冲液和RNase－free ddH₂O。本发明根据菜豆荚斑驳病毒基因的保守区域设计特异性引物，利用TC－RT－PCR技术对菜豆荚斑驳病毒进行检测，无需繁琐的RNA提取步骤，直接对病毒提取液进行反转录和PCR，不仅操作简便、结果稳定、特异性强、灵敏度高，而且检测成本相对较低，因此具有较高的实用价值。

主权项

1、一种菜豆荚斑驳病毒的检测试剂盒，其特征在于其组成为：(1)1#液，含有病毒抽提试剂：PBS缓冲液，浓度1×，pH7.4；(2)2#液，含有菜豆荚斑驳病毒上游引物：5’-GGCAATTTTAGAGCAAGTGTTG-3’，浓度10μmol/L；(3)3#液，含有菜豆荚斑驳病毒下游引物：5’-GCATTTGGCATATTCATGAGAAT-3’，浓度10μmol/L；(4)4#液，含有RT Buffer，浓度5×；(5)5#液，含有RNA酶抑制因子，浓度40U/μL；(6)6#液，含有反转录酶，浓度200U/μL；(7)7#液，含有dNTPs，浓度10mmol/L；(8)8#液，含有PCR Buffer，浓度10×；(9)9#液，含有Mgcl2，浓度25mmol/L；(10)10#液，含有Taq DNA聚合酶，浓度5U/μL；(11)11#液，含有菜豆荚斑驳病毒阳性对照；(12)12#液，含有菜豆荚斑驳病毒阴性对照；(13)13#液，含有PBST缓冲液，浓度1×；(14)14#液，含有RNase-free ddH2O。