[发明专利]二羟基丙酮高产菌的快速筛选方法

摘要

本发明涉及二羟基丙酮高产菌的快速筛选的方法，将待选菌落接种至多孔板培养基中培养至长出单菌落，加入斐林试剂进行检测，单菌落周围显现棕红色晕斑，为阳性菌株；另取阳性菌株接种至斜面培养基，28～37℃下培养1～2天，获得阳性菌株的斜面菌种；斜面菌种接种至发酵培养基中，振荡培养得发酵液，测定发酵液中DHA的含量，经发酵获得的发酵液中DHA含量高于2g/L的阳性菌株，即为二羟基丙酮高产菌；本发明有益效果：操作简单、结果判断直观方便，能快速、高通量筛选或复壮产二羟基丙酮的微生物菌株，大大减少劳动量，提高劳动效率。

主权项

1.二羟基丙酮高产菌的快速筛选方法，所述方法包括如下顺序步骤：(1)取待筛选菌株，接种至多孔板培养基中，28～37℃下培养至长出单菌落，加入斐林试剂，25～35℃下放置10～60min，单菌落周围显现棕红色晕斑，为阳性菌株；所述多孔板培养基组成如下：甘油20～50g/L，酵母粉2～5g/L，琼脂18～20g/L，溶剂为水，pH5.0～7.0；(2)另取阳性菌株接种至斜面培养基，28～37℃下培养1～2天，获得阳性菌株的斜面菌种；所述斜面培养基的组成如下：甘油20～50g/L，酵母粉2～5g/L，琼脂18～20g/L，溶剂为水，pH5.0～7.0；(3)将阳性菌株的斜面菌种接种至发酵培养基，28～37℃、100～200rpm振荡培养24～60h，得到发酵液，测定发酵液中DHA含量，经发酵获得的发酵液中DHA含量高于2g/L的阳性菌株，即为二羟基丙酮高产菌；所述发酵培养基组成如下：甘油10～50g/L，酵母粉2～20g/L，蛋白胨1～20g/L，NaH2PO4·2H2O 1～5g/L，CaCO3，1～4g/L，溶剂为水，pH4.0～7.0。