[发明专利]卷烟烟气致突变性的毒理学测定评价方法

摘要

一种卷烟烟气致突变性的毒理学测定评价方法，其特征在于：它包括以下步骤：(1)选择实验菌株；(2)准备实验所用材料；(3)制备卷烟烟气凝集物CSC；(4)接种、培育细胞；(5)观察结果与判断。本发明提供的方法相对于传统AMES实验方法，具有操作更方便、敏感性更高、结果更可靠的优点。

主权项

1、一种卷烟烟气致突变性的毒理学测定评价方法，其特征在于：它包括以下步骤：(1)选择实验菌株，采用两株符合Ames试验标准的鼠伤寒沙门氏菌突变型菌株TA98和TAI00；(2)准备实验所用材料，包括用于细胞培养的基本培养基、磷酸盐缓冲液、活化系统S-9混合液、Vogel-Bonner缓冲液贮备液；(3)制备卷烟烟气凝集物CSC，将烟气分别经过有机相(乙酸乙酯)和无机相(基础培养液)收集，将有机溶剂挥发后，与无机培养液混合，并用细胞培养液将浓度调整为1支烟/ml；(4)接种、培育细胞，TA98及TA100接种于营养肉汤培养基中，于37℃振荡(100次/min)培养10h，96孔板中每孔加入50μl含500个细菌的受试菌混合物，并加入各浓度受试物，各受试物分别采用0.0025，0.005，0.01及0.02支烟/ml浓度进行测试，每种浓度每种菌接种48个孔，37℃孵育16h后加入选择培养基150μL，继续培养72h后观察，孔内培养物由紫色变为黄色为阳性；(5)观察结果与判断，计数每种菌每种CSC每个浓度阳性孔数，以浓度为横坐标，阳性孔数的对数为纵坐标作图，采用直线回归分别拟合方程，计算50％突变剂量，作为衡量CSC致突变能力的指标。