[发明专利]基于微间隙阵列电极的酶催化电导免疫传感器及其免疫检测方法

摘要

本发明提供了一种基于微间隙阵列电极的酶催化电导免疫传感器及其免疫检测方法，免疫传感器包括微间隙阵列电极、硅烷化处理的电极基片、具有良好导电性的酶沉积物；本发明利用微间隙电极阵列免疫传感器，通过在电极间隙基片上固定待测物的抗体，利用酶标抗体夹心进行待测蛋白的检测，该方法灵敏度高，操作简单，仪器便携且价格低廉，可望为疾病早期与现场检测应用提供快速、实用、低成本、高灵敏、高通量的免疫检测技术。

主权项

1.一种基于微间隙阵列电极的酶催化电导免疫传感器，其特征是，采用微间隙阵列金电极做基片，并采用以下步骤制得：(1)取常规光刻印刷法制作的微间隙阵列金电极做基片，它为叉指式双电极，正负电极均为两个梳形金电极，彼此交叉组成微间隙阵列金电极，梳形齿宽为1μm-100μm，间隙为1μm-100μm；(2)微间隙阵列金电极的硅烷化处理，其步骤是：a.将所述微间隙阵列金电极用无水乙醇清洗三次，每次1min；b.将该电极浸入1M的NaOH溶液中，静置28min-32min；c.用超纯水清洗该电极三次，每次1min；吹干；d.将该电极浸入含氨丙基三甲氧基硅烷5％(体积百分数)的乙醇溶液中，室温下静置23小时-25小时；这样可在微间隙阵列金电极间的基片上形成一氨基硅烷自组装单层；e.用超纯水清洗三次，吹干，获得硅烷化的微间隙阵列金电极；(3)免疫传感器的制备步骤：a.将所述硅烷化的微间隙阵列金电极浸入质量分数为5％的戊二醛水溶液，室温下静置0.8小时-1.2小时，再用超纯水清洗三次；b.在所述电极上滴加30μL待测物的鼠单克隆或羊多克隆抗体溶液，室温下静置反应0.8小时-1.2小时；这样使得抗体通过戊二醛交联剂固定在微间隙阵列金电极的基片上；所述鼠单克隆或羊多克隆抗体溶液中的抗体浓度为100μg/mL，该抗体溶液是将所述抗体溶于0.01M、pH7.4磷酸缓冲溶液而得；c.用超纯水清洗所述电极三次，吹干，得到免疫传感器；保存于4℃备用。