[发明专利]从蓝藻中快速分离纯化C－藻蓝蛋白和异藻蓝蛋白的方法无效
| 申请号： | 200810014404.0 | 申请日： | 2008-02-28 |
| 公开（公告）号： | CN101240010A | 公开（公告）日： | 2008-08-13 |
| 发明（设计）人： | 张玉忠;颜世敢;陈秀兰;张熙颖;周百成 | 申请（专利权）人： | 山东大学 |
| 主分类号： | C07K1/14 | 分类号： | C07K1/14;C07K1/30;C07K1/18 |
| 代理公司： | 济南金迪知识产权代理有限公司 | 代理人： | 许德山 |
| 地址： | 250100山东*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 一种从蓝藻中快速分离纯化C－藻蓝蛋白和异藻蓝蛋白的方法，属于藻蓝蛋白分离纯化技术领域。本发明应用经冻溶和低离子强度溶涨快速提取C－藻蓝蛋白和异藻蓝蛋白，然后经硫酸铵沉淀进行初步纯化，最后利用琼脂糖凝胶FF(DEAE Sepharose Fast Flow)离子交换层析技术，用恒定的离子强度、pH梯度的缓冲液进行洗脱，一步法可以得到高纯度的C－藻蓝蛋白和异藻蓝蛋白。本方法操作简便，省时省力，对设备要求简单，得率高并且大大降低了CPC和APC的制备成本，从而为将CPC和APC应用于超灵敏的生物医学检测奠定了基础。 | ||
| 搜索关键词： | 蓝藻 快速 分离 纯化 蛋白 异藻蓝 方法 | ||
【主权项】：
1、从蓝藻中快速分离纯化C-藻蓝蛋白和异藻蓝蛋白的方法，步骤如下：(1)原料为蓝藻，采用液氮研磨的方法，使蓝藻解体溶解，离心去除细胞残渣，收集上清液得到C-藻蓝蛋白和异藻蓝蛋白粗提液；(2)将步骤(1)的粗提液，用硫酸铵沉淀法，使C-藻蓝蛋白和异藻蓝蛋白从粗提液中沉淀出来，离心收集沉淀，再用pH5.8～6.0、20mM磷酸缓冲液溶解并透析，除去硫酸铵，即得C-藻蓝蛋白和异藻蓝蛋白溶液；(3)将步骤(2)制得的C-藻蓝蛋白和异藻蓝蛋白溶液，用离子交换层析，并用具有恒定的离子强度、连续pH梯度的缓冲液进行洗脱，分别获得高纯度的C-藻蓝蛋白和异藻蓝蛋白。
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