[发明专利]利用A3启动子缺陷piggyBac转座子创制转基因家蚕方法无效
申请号: | 200710164477.3 | 申请日: | 2007-12-05 |
公开(公告)号: | CN101177692A | 公开(公告)日: | 2008-05-14 |
发明(设计)人: | 杨惠娟;钟伯雄;陆长德;庄兰芳;范伟;兰天云;丁农 | 申请(专利权)人: | 浙江大学 |
主分类号: | C12N15/89 | 分类号: | C12N15/89;C12N15/85;A01K67/04 |
代理公司: | 杭州求是专利事务所有限公司 | 代理人: | 林怀禹 |
地址: | 310027浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明公开了一种利用A3启动子缺陷piggyBac转座子创制转基因家蚕方法。是先切除带有荧光标志基因的piggyBac转座子中A3启动子,利用转基因技术将这种启动子缺陷转座子插入家蚕功能基因的启动子后面,借助功能基因启动子的作用表达荧光标志基因,创制成一种转基因家蚕,这种转基因家蚕能够用于组织特异性表达启动子的筛选和基因功能研究,达到育成具有特异性功能家蚕新品种。 | ||
搜索关键词: | 利用 a3 启动子 缺陷 piggybac 座子 创制 转基因 家蚕 方法 | ||
【主权项】:
1.一种利用A3启动子缺陷piggyBac转座子创制转基因家蚕方法,其特征在于该方法的步骤如下:(1)采用BglII和BamHI双酶切,切去带有荧光标志基因的piggyBac质粒中长度为853bp的A3启动子,回收大片段7124bp,自连接得到A3启动子缺陷的piggyBac质粒;(2)采用蚕卵显微注射转基因方法,导入A3启动子缺陷的piggyBac质粒及其能够提供转座酶的辅助质粒,在G0代或G0以后代蚁蚕时期,通过选择荧光标志基因获得转基因家蚕,饲养至成虫交配续代;(3)育成能够用于组织特异性表达启动子的筛选和基因功能研究的转基因家蚕。
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