[发明专利]一种蛋白质分子印迹整体柱的制备方法

摘要

本发明涉及一种蛋白质分子印迹整体聚合物的制备方法。将适当配比的功能单体、交联剂和蛋白质模板分子在0～4℃下静置2～5分钟，随后依次加入一定量的引发剂和增速剂。将上述混合物迅速注入液相色谱柱管后，放置于-5～-20℃环境中在1～12小时内完成聚合反应。用重量浓度为10％的十二烷基磺酸钠与体积浓度为10％的乙酸溶液洗脱模板蛋白质分子，即可制备大孔蛋白质分子印迹整体柱。本发明的优点为制备方法简单、可靠，获得的蛋白质分子印迹整体柱具有较强的模扳分子识别特性。该技术为发展蛋白质分子印迹整体柱提供了一种新型制备方法。

主权项

1. 一种蛋白质分子印迹整体柱的制备方法，其特征在于：以丙烯酰胺和/或甲基丙烯酰胺为功能单体，功能单体与交联剂溶于10mM的pH4.5～7.5的磷酸盐缓冲溶液中；缓冲溶液中功能单体的重量浓度为3.0～6.5％，交联剂的重量浓度0.35～0.7％；通入氮气除氧后加入模板分子，模板分子于缓冲溶液中的重量浓度为0.15～0.55％，并在0～4℃下静置2～5分钟；随后加入引发剂过硫酸铵和增速剂N，N，N`，N`-四甲基乙二胺，缓冲溶液中引发剂的重量浓度为0.08～0.2％，增速剂的重量浓度为0.1～0.15％；混合均匀后迅速注入液相色谱柱管中，放入-5～-20℃环境中聚合1～12小时；聚合反应结束后，用含有重量浓度9-11％十二烷基磺酸钠的体积浓度为9-11％乙酸混合液洗脱聚合物上的模板蛋白，获得大孔蛋白质分子印迹整体柱；最后，用pH4.5～7.5磷酸盐缓冲液冲洗柱子至色谱基线平衡即可使用；所述模板分子为牛血清白蛋白、溶菌酶或细胞色素C。