[发明专利]一种成人远端肺动脉平滑肌细胞的培养方法无效
申请号: | 200710033016.2 | 申请日: | 2007-12-29 |
公开(公告)号: | CN101250500A | 公开(公告)日: | 2008-08-27 |
发明(设计)人: | 王健;洪城;冉丕鑫;李冰;卢文菊;彭公永;胡锦兴;李晓岩 | 申请(专利权)人: | 广州医学院 |
主分类号: | C12N5/08 | 分类号: | C12N5/08 |
代理公司: | 广州知友专利商标代理有限公司 | 代理人: | 宣国华 |
地址: | 510082广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明公开了一种成人远端肺动脉平滑肌细胞的培养方法,包括以下步骤:(1)从获取的成人远端肺动脉平滑肌层中分离肺动脉平滑肌细胞,并进行原代细胞培养;(2)获取传代培养的成人远端肺动脉平滑肌细胞:当步骤(1)中的原代细胞长至对数生长期后,取出原代细胞用PBS溶液清洗后,加入0.3~0.5ml 0.1%~0.2%胰蛋白酶溶液35~37℃消化2~3分钟,当细胞出现回缩、细胞间隙增大时,吸除胰蛋白酶溶液,加入3~5ml完全培养液,使之形成细胞悬液,接种于新的培养瓶中,每3天换液一次,即完成传代细胞培养,获得传代培养的成人远端肺动脉平滑肌细胞。该培养方法技术稳定,重复性好,培养的细胞形态均一,生长良好,且具有典型的平滑肌细胞的形态及特点。 | ||
搜索关键词: | 一种 成人 远端 肺动脉 平滑肌 细胞 培养 方法 | ||
【主权项】:
1、一种成人远端肺动脉平滑肌细胞的培养方法,其特征在于:包括以下步骤:(1)获取原代培养的成人肺动脉平滑肌细胞:从获取的成人远端肺动脉平滑肌层中分离肺动脉平滑肌细胞,并进行原代细胞培养,获得原代培养的成人远端肺动脉平滑肌细胞;(2)获取传代培养的成人远端肺动脉平滑肌细胞:当步骤(1)中的原代细胞长至对数生长期后,取出原代细胞用PBS溶液清洗后,加入0.3~0.5ml 0.1%~0.2%胰蛋白酶溶液35~37℃消化2~3分钟,当细胞出现回缩、细胞间隙增大时,吸除胰蛋白酶溶液,加入3~5ml完全培养液,使之形成细胞悬液,接种于新的培养瓶中,每3天换液一次,即完成传代细胞培养,获得传代培养的成人远端肺动脉平滑肌细胞。
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