[发明专利]优化的小片段RNA载体系统及其构建方法有效
| 申请号： | 200610166613.8 | 申请日： | 2006-12-31 |
| 公开（公告）号： | CN101210253A | 公开（公告）日： | 2008-07-02 |
| 发明（设计）人： | 李超;封江南;黄俊;黄映雪;孙永林;张云;康德娇;严俊 | 申请（专利权）人： | 国营武昌造船厂 |
| 主分类号： | C12N15/66 | 分类号： | C12N15/66;C07H21/02 |
| 代理公司： | 武汉开元专利代理有限责任公司 | 代理人： | 樊戎;夏惠忠 |
| 地址： | 430060*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种优化的小片段RNA载体的改造方案及该载体的配套制备方法，包括以下步骤：1.以晶赛公司的编码多条shRNA质粒载体pEGFP6－1为骨架进行启动子序列，生物元件布局及筛选基因插入等一系列改造，从而构建出优化的编码小片段RNA载体pGenesil－1.2；2.化学合成编码各小片段RNA所需的DNA模板并构建入pGenesil－1.2中，然后利用此系统中的双重筛选方案筛选克隆并经测序鉴定完成构建工作；本发明有效克服了当前科研领域及市场中常规制备小片段RNA载体所面临的启动子3＇端突变、构建过程中鉴定困难、合成模板DNA引物长和成本高等问题，同时以一种优化的结构使转录小片段RNA的启动子有更高的转录效率。 | ||
| 搜索关键词： | 优化 片段 rna 载体 系统 及其 构建 方法 | ||
【主权项】：
1.一种优化的小片段RNA载体系统及其构建方法，其特征在于包括以下步骤：(1)以晶赛公司的编码多条shRNA质粒载体pEGFP6-1为骨架进行启动子序列，生物元件布局及筛选基因插入等一系列改造从而构建出优化的编码小片段RNA载体pGenesil-1.2；(2)化学合成编码各小片段RNA所需的DNA模板并构建入pGenesil-1.2中，然后利用此系统中的双重筛选方案筛选克隆并经测序鉴定完成构建工作；(3)将构建成功的编码小片段RNA表达载体经多方面的有益性评价及实际应用效果测定。
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