[发明专利]一种液体深层发酵生产块菌多糖的培养基

摘要

本发明公开了一种液体深层发酵生产块菌多糖的培养基。该培养基由乳糖、蛋白胨、硫酸镁、磷酸二氢钾按一定比例构成，其块菌多糖的制备步骤首先是斜面菌种培养，其次是液体种子培养，最后是液体深层发酵。本发明通过对中国块菌的斜面菌种、一级液体种子和二级液体种子的培养来稳定其生理状况，在液体深层发酵阶段着重考察了不同碳源、氮源及起始pH值对块菌液体深层发酵过程中块菌多糖产量的影响。在该培养基中块菌生长迅速，发酵周期短，多糖产量高，成本低，适用于工业化大规模生产块菌多糖。

主权项

1、一种液体深层发酵生产块菌多糖的制备方法，它包括下列步骤：A、斜面菌种培养：将中国块菌菌种接种于斜面培养基上，接种完后置于生化培养箱里培养，培养温度15-40℃，培养时间2-20天，所述的斜面菌种培养基配方为：麦芽糖30-150克/升，硫酸镁1.0-10克/升，磷酸二氢钾1.0-10克/升，琼脂10-30克/升，马铃薯提取液1.0升，pH值为5-8；B、液体种子的培养：将步骤A中培养的斜面菌种转接入装有一级液体种子培养基的摇瓶中进行一级液体种子培养，培养条件为：温度15-40℃、摇床转速50-300转/分钟、时间2-20天；该培养液即为含有菌种的一级液体种子，所述的一级液体种子培养基配方为：麦芽糖30-150克/升、蛋白胨5-50克/升、硫酸镁1.0-10克/升、磷酸二氢钾1.0-10克/升、pH值5-8，培养条件为：温度15-40℃、摇床转速50-300转/分钟、培养时间2-10天；将培养好的一级液体种子转接摇瓶进行二级液体种子培养，二级液体种子培养基与一级液体种子培养基相同，接种量10％/体积比，所得到的培养液即为含有菌种的二级液体种子；C、块菌液体深层发酵：将步骤B中所培养的二级液体种子转接摇瓶进行液体深层发酵，发酵条件：接种量10％/体积比、温度15-40℃、摇床转速50-300转/分钟、发酵时间2-20天，所述的液体深层发酵培养基中无机盐成分为硫酸镁0.1-10克/升、磷酸二氢钾0.1-10克/升，碳源为麦芽糖、乳糖、果糖、或半乳糖；氮源为蛋白胨、尿素、酵母膏、牛肉浸膏、硫酸铵、氯化铵、硝酸钠、硝酸钾、硝酸铵，起始pH值为2-9，根据碳源、氮源、起始pH值的选择，将液体深层发酵培养基用水溶解后调至指定的pH值，置于高压灭菌锅内121℃灭菌20分钟后即完成该液体深层发酵培养基的制备。