[发明专利]一种重组酵母Pp420D生产漆酶的方法有效
| 申请号： | 200610147190.5 | 申请日： | 2006-11-09 |
| 公开（公告）号： | CN1952111A | 公开（公告）日： | 2007-04-25 |
| 发明（设计）人： | 肖亚中;洪宇植;周宏敏;李剑凤 | 申请（专利权）人： | 安徽大学 |
| 主分类号： | C12N1/19 | 分类号： | C12N1/19;C12N9/02 |
| 代理公司： | 安徽省合肥新安专利代理有限责任公司 | 代理人： | 何梅生 |
| 地址： | 23000*** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | 一种重组酵母Pp420D生产漆酶的方法，由申请人自主构建的基因工程菌株酵母Pp420D制备种液后接种在培养基上于25～31℃条件培养20～30小时，维持溶氧25～35％，然后按每升发酵培养基每小时添加12～25mL营养液的速度流加甲醇营养液，于18～28℃条件下继续培养7～10天后过滤分离，发酵液即是漆酶粗制剂，添酶酶活超过2.0×105U/L(ABTS法)。粗制剂加水稀释后可直接用于纸浆漂白、染料脱色、纤维软化、饲料加工等，纯化后可用于食品、饮料或生物传感器。本方法生产周期短、产量高，生产过程无需毒性芳香化合物诱导，对环境安全、无毒害作用，且后处理简单，适合大规模生产。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 重组 酵母 pp420d 生产 方法 | ||
【主权项】：
1、一种重组酵母Pp420D生产漆酶的方法，包括培养基配制、灭菌、接种、种液制备和发酵培养以及后处理，其特征在于：所述的发酵培养就是将制备的种液接种在经灭菌的pH4.0～7.0的发酵培养基中，于25～31℃条件下培养20～30小时，维持溶氧25～35％，然后按每升发酵培养基每小时添加12～25mL营养液的速度流加甲醇营养液，于18～28℃条件下继续培养7～10天后进行后处理；所述的发酵培养基为每升水中含30～50g甘油、10～25g K2SO4、10～20g MgSO4·7H2O、3～5g KOH、0.5～1.5g CaSO4、20～35mL 85％的H3PO4；所述的甲醇营养液为每升甲醇中含1.0～1.5vt％的微量元素母液，微量元素母液为每升水中含40～80g FeSO4·7H2O、15～30g ZnCl2、3～9g CuSO4·5H2O、2～4g MgSO4·7H2O、0.3～0.6gCoCl2、0.1～0.4g生物素、0.1～0.3g Na2MoO4、0.01～0.03g H3BO3、0.06～0.1g NaI、3～7mL浓H2SO4。
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